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一种同时监测两种microRNA的树形核酸结构的构建方法及其应用 

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申请/专利权人:南京大学

摘要:本发明公开了一种同时监测两种阿尔茨海默病相关microRNAmiRNA的树形核酸结构的构建方法,在本方法中,两种miRNA以相互依赖的形式维持分支链的生长,在此机制下,只有两种miRNA同时存在时,才有可能形成树枝形高聚物。通过荧光分子标记,可对此高聚物进行区分。所提出的方法能够同时对两种miRNA进行定量分析,有望成为一种高效分析miRNA的方法,用于早期诊断阿尔茨海默病及其他疾病相关的miRNA。

主权项:1.一种同时监测两种miRNA的树形核酸结构的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)、准备待检测疾病的两种miRNA,分别为miR-1和miR-2,以及两种连接DNA,分别为BL-1和BL-2,其中,BL-1的5’末端和3’末端能够分别与一条miR-1的5’端和另一条miR-1的3’末端相连,BL-2的5’末端和3’末端能够分别与一条miR-2的5’端和另一条miR-2的3’末端相连,且BL-1与BL-2的中间部分又分别与miR-2和miR-1的5’端杂交;(2)、将步骤(1)中miR-1、miR-2、BL-1和BL-2分别溶于TE缓冲液中得到各自的溶液;(3)、按一比一比例分别取BL-1溶液与BL-2溶液混合于杂交缓冲液中,然后按一比一比例向上述杂交缓冲液再加入miR-1溶液与miR-2溶液,将混合液先80℃~100℃变性10~20min,随后在1℃~6℃下孵育2h,得到整合了两种miRNA的核酸树形分子。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 南京大学 一种同时监测两种microRNA的树形核酸结构的构建方法及其应用

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