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一种天然牛黄及其代用品的鉴别方法和应用 

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申请/专利权人:安徽中医药大学

摘要:本发明公开了一种天然牛黄及其代用品的鉴别方法和应用,包括步骤:采用超高效液相色谱‑混合四极轨道质谱法对天然牛黄及其代用品的胆酸类成分进行定性、定量分析,建立牛黄及其代用品的胆酸类成分色谱图;利用多元统计分析技术筛选天然牛黄及其代用品中的显著差异性胆酸类成分;建立天然牛黄及其代用品的判别函数方程,对天然牛黄及其代用品进行鉴别。本发明不仅能够直观、快速准确地鉴别牛黄及其代用品的药材,而且为进一步研究含牛黄或其代用品的相关成药的质量提供了实验基础,为中成药质量控制提出了一种新的且简单的评价标准,同时也对中药复方质量控制体系的构建提供参考。

主权项:1.一种天然牛黄及其代用品的鉴别方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)采用超高效液相色谱-混合四极轨道质谱法对天然牛黄及其代用品的胆酸类成分进行定性、定量分析,建立天然牛黄及其代用品的胆酸类成分色谱图;所述色谱条件为:HypersilGoldC18色谱柱;流动相A为5mmol·L-1的醋酸铵溶液,流动相B为甲醇溶液;梯度洗脱,梯度洗脱程序为:0-2min,60%B;2-18min,60%-64%B;18-19min,64%-95%B;19-21min,95%B;21-22min,95%-60%B;22-24min,60%B;(2)利用多元统计分析技术筛选天然牛黄及其代用品中的显著差异性胆酸类成分;所述显著差异性胆酸类成分为胆酸、牛磺去氧胆酸、牛磺石胆酸、甘氨鹅去氧胆酸、猪去氧胆酸、去氧胆酸;所述多元统计分析技术包括层次聚类分析HCA、主成分分析PCA和正交偏最小二乘判别分析OPLS-DA中的一种或多种;(3)建立天然牛黄及其代用品的判别函数方程,对天然牛黄及其代用品进行鉴别;所述天然牛黄及其代用品的判别函数方程为:Y1=-0.034S1+0.345S2-3.071S3+0.121S4+0.515S5+0.071S6-91.575;Y2=0.253S1+2.142S2+4.959S3+3.161S4-0.446S5-0.207S6-401.886;Y3=0.015S1+0.037S2-0.112S3+0.145S4-0.023S5+0.023S6-1.997;Y4=0.472S1-0.783S2+5.061S3+2.361S4-0.619S5+0.379S6-204.836;其中,Y1为人工牛黄,Y2为牛胆粉,Y3为天然牛黄,Y4为体外培育牛黄;S1为胆酸,S2为牛磺去氧胆酸,S3为牛磺石胆酸,S4为甘氨鹅去氧胆酸,S5为猪去氧胆酸,S6为去氧胆酸;(4)将待测样品按照步骤(1)的条件进行测定,将筛选出的显著差异性胆酸类成分的含量代入步骤(3)的判别函数方程中,比较不同类别牛黄及其代用品函数方程的Y值,样品属于Y值最大的方程所代表的牛黄来源类别。

全文数据:

权利要求:

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