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一种龙牙蕉植株再生的培养基组合及其植株再生方法 

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申请/专利权人:中国热带农业科学院南亚热带作物研究所

摘要:本发明涉及植物组织培养技术领域,特别是涉及一种龙牙蕉植株再生的培养基组合及其植株再生方法。培养基组合主要包括体胚诱导培养基和体胚萌发培养基;体胚诱导培养基为:MS+6‑BA0.2~0.8mgL+NAA0.2~0.8mgL+IBA0.2~0.8mgL+蔗糖30gL+卡拉胶6~9gL;体胚萌发培养基为:MS+6‑BA1.0~3.0mgL+IBA0.1~0.3mgL+蔗糖30gL+卡拉胶6~9gL。采用本发明提供的培养基和方法,建立了一种龙牙蕉体胚诱导和植株再生的方法,提高了龙牙蕉的体胚诱导率和植株再生率。

主权项:1.一种龙牙蕉植株再生的方法,其特征在于,步骤为:1将龙牙蕉的外植体接种到培养基组合中的胚性愈伤组织前体诱导培养基上,进行胚性愈伤组织前体诱导培养,得到愈伤组织;2将所述步骤1得到的愈伤组织接种到培养基组合中的胚性愈伤组织诱导培养基上,进行胚性愈伤组织诱导培养,得到松散、淡黄色或米白色、透明的胚性愈伤组织;3将所述步骤2得到的胚性愈伤组织接种到培养基组合中的体胚诱导培养基上,进行体胚诱导培养,得到体细胞胚;4将所述步骤3得到的体细胞胚接种到培养基组合中的体胚萌发培养基上,进行体胚萌发培养,得到带叶鞘的嫩芽;5将所述步骤4得到的带叶鞘的嫩芽接种到培养基组合中的壮苗培养基上,进行壮苗培养,得到健壮芽;6将所述步骤5得到的健壮芽接种到培养基组合中的生根培养基上,进行生根培养,得到完整的龙牙蕉生根苗再生植株;所述龙牙蕉的品种为香粉1号,所述培养基组合为体胚诱导培养基、体胚萌发培养基、壮苗培养基、生根培养基、胚性愈伤组织前体诱导培养基和胚性愈伤组织诱导培养基;所述体胚诱导培养基为:MS+6-BA0.5mgL+NAA0.5mgL+IBA0.5mgL+蔗糖30gL+卡拉胶7gL,pH值为5.8;所述体胚萌发培养基为:MS+6-BA2.0mgL+IBA0.2mgL+蔗糖30gL+卡拉胶8gL,pH值为5.8;所述壮苗培养基为:MS+NAA0.2mgL+蔗糖30gL+卡拉胶7gL,pH值为5.8;所述生根培养基为:12MS+IBA1.0mgL+NAA0.4mgL+活性炭1.0gL+蔗糖30gL+卡拉胶7gL,pH值5.8;所述胚性愈伤组织前体诱导培养基为:KNO32830mgL、NH42SO4463mgL、KH2PO4400mgL、MgSO4·7H2O185mgL、CaCl2·2H2O166mgL、Na2EDTA37.3mgL、FeSO4·7H2O27.8mgL、肌醇100.00mgL、盐酸硫胺素10.00mgL、盐酸吡哆素1.00mgL、烟酸1.00mgL、MnSO4·4H2O10.00mgL、ZnSO4·7H2O2.00mgL、H3BO33.00mgL、KI0.75mgL、Na2MoO4·2H2O0.25mgL、CuSO4·5H2O0.025mgL、CoCl2·6H2O0.025mgL、2,4-D4.0mgL、生物素1.0mgL、NAA1.0mgL、IAA1.0mgL、谷氨酰胺100mgL、麦芽提取物100mgL、活性炭0.5gL、蔗糖30gL、卡拉胶7gL;所述胚性愈伤组织诱导培养基为:KNO32830mgL、NH42SO4463mgL、KH2PO4400mgL、MgSO4·7H2O185mgL、CaCl2·2H2O166mgL、甘氨酸2.00mgL、肌醇100.00mgL、盐酸硫胺素0.40mgL、盐酸吡哆素0.50mgL、烟酸0.50mgL、Na2EDTA37.3mgL、FeSO4·7H2O27.80mgL、MnSO4·4H2O22.30mgL、ZnSO4·7H2O8.60mgL、H3BO36.20mgL、KI0.83mgL、Na2MoO4·2H2O0.25mgL、CuSO4·5H2O0.025mgL、CoCl2·6H2O0.025mgL、6-BA0.1mgL、谷氨酰胺200mgL、活性炭0.2gL、蔗糖30gL、卡拉胶7gL;所述步骤1胚性愈伤组织前体诱导培养的条件为:暗培养,温度为26~27℃,每2周更换1次培养基,培养时间为2~3个月;所述步骤2胚性愈伤组织诱导培养的条件为:暗培养,温度为26~27℃,每2周更换1次培养基,培养时间为1~2个月;所述步骤3体胚诱导培养的条件为:暗培养,温度为26~28℃,每2周更换1次培养基,培养时间为1~2个月;所述步骤4体胚萌发培养的条件为:暗培养,温度为26~27℃,每2周更换1次培养基,培养时间为1~2个月;所述步骤5壮苗培养的条件和步骤6生根培养的条件都为:温度为26~28℃,光照时间为16h光照8h黑暗、光照强度为1600-2000lux,培养时间为2~3周。

全文数据:

权利要求:

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