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申请/专利权人：贵州医科大学
摘要：本发明提供一种中药玉竹根腐病致病菌的分离、鉴定方法及对该病害化学防治试剂。分离、鉴定方法包括：1病株采集:2病原菌分离纯化:3病原菌回接实验:4形态学鉴定:5DNA提取:6PCR扩增:7测DNA序列:8药剂筛选实验:9结果分析。本发明先对病原菌的鉴定，再通过室内药剂筛选得到有效抑制该病害的化学药剂，他们是50%嘧菌酯，50%多菌灵。本发明的方法为防治玉竹根腐病的防治提供了化学药剂基础。
主权项：1.一种中药玉竹根腐病致病菌的分离、鉴定方法，其特征在于按如下的步骤进行:1病株采集:在贵州省安顺市西秀区刘官乡中药材种植基地采集典型病株，并描述病株形态;2病原菌分离纯化:将病变部位接种到培养基中，通过多次接种分离得到纯的病原菌菌株;3病原菌回接实验:选取健康的玉竹根部组织，将分离菌株接种到健康玉竹根部组织上，放入培养皿中保湿培养，随时注意病斑变化；之后将接种部位病斑与采集的玉竹病害病斑进行对比，筛选出致病菌；4形态学鉴定:将筛选出的病原菌进行培养，待菌落产孢，挑取菌落边缘菌丝，于显微镜下观察病原菌形态特征；5DNA提取:根据DNA提取试剂盒的步骤提取病原菌DNA，设立两组实验a和b；6PCR扩增:将提取的DNA进行PCR扩增，用凝胶成像系统显色，之后将DNA测序；7测DNA序列:测序之后，构建系统发育树，判断病原菌种属；其病原菌为简青霉；8药剂筛选实验:选取3种化学试剂，分别为50%嘧菌酯、50%多菌灵、格菌.精甲霜，进行室内药剂筛选药剂，配置为1mgL、5mgL、25mgL、125mgL、625mgL5种浓度梯度溶液，将不同梯度药液与培养基以1：9比例配置为含药培养基，病原菌接种到培养基中，28℃恒温光照培养5d，通过十字交叉测得菌落直径，通过软件处理，得到毒力回归方程，抑制率，EC50等相关参数；9结果分析：比较3种化学药剂对病原菌的生长抑制作用，筛选出用于防治该病原菌的化学试剂。
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百度查询： 贵州医科大学 一种中药玉竹根腐病致病菌的分离、鉴定方法及应用
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