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申请/专利权人：中国检验检疫科学研究院;三亚中国检科院生物安全中心

摘要：本发明属于分子检测技术领域，具体涉及一种可同时检测玉米细菌性枯萎病菌和玉米矮花叶病毒的试剂盒和方法。本发明中，以玉米细菌性枯萎病菌和玉米矮花叶病毒为研究对象，将CRISPR‑Cas12a系统与CRISPR‑Cas13a系统结合，开发了一种快速、灵敏的可同时检测玉米细菌性枯萎病菌和玉米矮花叶病毒的检测体系，更加适用于现场检测。

主权项：1.一种试剂盒，其含有用于检测玉米细菌性枯萎病菌Pantoeastewartiisubsp.stewartia的第一检测体系和用于检测玉米矮花叶病毒maizedwarfmosaicvirus的第二检测体系中的至少一个检测体系；在每个反应体系中分别包括上游引物、下游引物和crRNA；在所述第一检测体系中，上游引物为Pss-RPAF，下游引物为Pss-RPAR，crRNA为Pss-Cas12-crRNA；Pss-RPAF的核苷酸序列如下所示：5'-CTTAATCAGCACTACCTTGCAGAGGACACGTC-3'；Pss-RPAR的核苷酸序列如下所示：5'-TCCCAGAGACACAGCATCATTCTGAGCACGTGAG-3'；Pss-Cas12-crRNA的核苷酸序列如下所示：5'-UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCAAGACAGGCAAAUGACGGAAAAGGC-3'；在所述第二检测体系中，上游引物为MDMV-RPAF，下游引物为MDMV-RPAR，crRNA为MDMV-Cas13-crRNA；MDMV-RPAF的核苷酸序列如下所示：5'-TAATACGACTCACTATAGGGATGAAGTGATAGATGTCAAACATCAAGCTGGTGAAA-3'；MDMV-RPAR的核苷酸序列如下所示：5'-CCATCACCAGTCTTCTCAGTTGCCTTCTCCTTAT-3'；MDMV-Cas13-crRNA的核苷酸序列如下所示：5'-GAUUUAGACUACCCCAAAAACGAAGGGGACUAAAACAAGAAAGCGAAGGAAGCUGAGGCUAAAC-3'。

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百度查询： 中国检验检疫科学研究院 三亚中国检科院生物安全中心 可同时检测玉米细菌性枯萎病菌和玉米矮花叶病毒的试剂盒和方法