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申请/专利权人：深圳市百迈生命科学有限公司;泰州百迈生物科技有限公司
摘要：本发明提供一种耐药基因检测方法，涉及基因检测技术领域。基于多重荧光标记，单管完成复合扩增，通过收集相关耐药基因序列，比对选择基因保守区域，设计特异性扩增引物。本发明首次实现了在单次检测中，同时检测多个耐药基因的检测。经过筛查之后确定了引物序列及引物加量。复合扩增引物做了减少扩增时间的测试，最终确定了复合扩增的程序。使用片段分析软件分析收集的数据。解决了传统细菌耐药性检测方法虽能提供细菌耐药的表型信息，需要长时间的培养和鉴定，且无法检测耐药基因的问题，突破现有技术的限制，可以在不进行长时间培养和鉴定的情况下，进行检测耐药基因，实现高效快速检测。
主权项：1.一种耐药基因检测方法，其特征在于，包括：引物组配：按照预设基因序列参数表，将由HPLC纯化后，且纯度至少为95％的引物，组配成5X引物混合物；2.5XReactionMIX组配：按照预设比例将缓冲液、化学盐、有机物助剂以及DNA聚合酶混合组成2.5X反应组合物；样本提取：获取灭活后的菌株浓度为100cfumL的混合检测样本，并分别进行10倍、100倍以及1000倍稀释，再通过BufferAVE试剂洗脱，获得1000cfumL，100cfumL和10cfumL三种浓度混合菌液的样本DNA；PCR体系和扩增：将所述5X引物混合物、所述2.5X反应组合物以及所述样本DNA按预设配置表配置，并按照预设次序循环扩增反应，获得PCR产物；PCR检测：将预先处理好的荧光染色剂与所述PCR产物进行混合，并依次通过加热变性第一预设时长，冰浴第二预设时长，以及通过基因测序仪进行电泳检测，获得检测结果；片段分析：通过片段分析软件，基于检测结果的检测峰和样本的扩增峰相对的降低情况，确定是否检出耐药基因。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 深圳市百迈生命科学有限公司 泰州百迈生物科技有限公司 一种耐药基因检测方法及系统
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