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一种核酸分子定量检测方法 

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申请/专利权人:苏州宇测生物科技有限公司

摘要:本发明公开了一种核酸分子定量检测方法,可用于核酸分子单分子浓度级别的定量检测。本发明利用在颗粒材料上修饰用于核酸分子扩增的引物,将单个核酸分子的所有扩增产物固定在颗粒材料表面或内部,利用信号标记物进行扩增产物信号标记,利用检测系统实现单分子扩增产物的检测,从而实现单分子浓度水平的核酸分子检测。

主权项:1.一种核酸分子定量检测的方法,包括如下步骤:a使用一种颗粒材料,并在所述的颗粒材料表面或内部偶联用于核酸分子扩增的引物,其中,所述的颗粒材料尺寸为100nm至1μm,所述颗粒材料为丙烯酰胺,所述步骤a的方法如下,取0.5mL水溶液,溶解0.1%的硫酸铵、2%丙烯酰胺单体、1μM丙烯酰胺-正向引物和1μM丙烯酰胺-反向引物;取1mL矿物油,加入1%四甲基乙二胺;将两相溶液混匀后,超声1h,过夜反应;加入破乳剂,离心使油水分层;取水相溶液,依次加入丙酮、异丙醇、水对水相溶液进行清洗,每次清洗后以7000rpm离心,收集沉淀;最后用100μL水溶液复溶;b将颗粒材料分散于流体中进行核酸分子扩增,核酸分子扩增产物被固定于颗粒材料表面或内部,其中,所述流体为溶解核酸分子待测样本的溶液;c使用信号标记物对所述的核酸分子扩增产物进行信号标记,利用检测设备对所述信号标记物信号进行检测;d利用定量分析系统进行定量检测,所述的定量分析系统通过直接对带有信号标记物信号的颗粒材料个数进行计数,通过所述的颗粒材料个数进行定量分析。

全文数据:

权利要求:

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