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一种蒙古冰草的遗传转化方法 

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申请/专利权人:中国科学院青岛生物能源与过程研究所

摘要:本发明提供了一种蒙古冰草的遗传转化方法,包括如下步骤:步骤一、对蒙古冰草的外植体进行诱导形成愈伤组织,将愈伤组织进行继代和分化培养,获得转化受体;步骤二、对步骤一获得的转化受体用农杆菌侵染液进行一次侵染;步骤三、对步骤二侵染后的转化受体进行暗培养筛选,筛选后采用农杆菌侵染液进行二次侵染;步骤四、对完成侵染的转化受体进行共培养,确定侵染效果。本申请设计并成功建立了蒙古冰草的遗传转化体系,将易侵染基因型蒙古冰草的侵染效率由不足5%提高到80%以上,并且在暗培养筛选2个月后,转入的目的基因仍能稳定的在蒙古冰草愈伤组织中表达,为蒙古冰草的分子育种研发提供了新方法。

主权项:1.一种蒙古冰草的遗传转化方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一、对蒙古冰草的外植体进行诱导形成愈伤组织,将所述愈伤组织进行继代和分化培养,获得转化受体;步骤二、对步骤一获得的转化受体用农杆菌侵染液进行一次侵染;步骤三、对步骤二完成一次侵染后的转化受体进行暗培养筛选,筛选后采用农杆菌侵染液进行二次侵染;所述暗培养的条件为:将一次侵染后的转化受体置于筛选培养基上,于22℃~26℃、黑暗环境下培养60~70天,且每2周继代一次;所述一次侵染和二次侵染的方法包括:将转化受体置于农杆菌侵染液中,于0.05~0.5MPa条件下抽真空5~20min,20kHz~30kHz条件下超声振荡3~5min,再于0.05~0.5MPa条件下抽真空5~20min;步骤四、对完成侵染的转化受体进行共培养,确定侵染效果。

全文数据:

权利要求:

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