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一种高细菌检测特异性的ATP荧光检测拭子及其使用方法 

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申请/专利权人:宁波大学

摘要:本发明提供了一种高细菌检测特异性的ATP荧光检测拭子及其使用方法,属于微生物检测技术领域。本发明的检测拭子包括细菌富集搅拌棒和拭子外壳,所述细菌富集搅拌棒的制备方法,包括:将聚二甲基硅氧烷搅拌棒插入金属有机框架ZIF‑90纳米颗粒中,进行金属有机框架材料修饰;将所述金属有机框架材料修饰后的聚二甲基硅氧烷搅拌棒插入噬菌体混合溶液中进行噬菌体修饰;将所述噬菌体修饰后的聚二甲基硅氧烷搅拌棒用牛血清白蛋白溶液封闭,得到细菌富集搅拌棒。本发明的检测拭子通过定向的噬菌体修饰的搅拌棒提取和生物增殖协同增强,能够快速捕获和富集食源性致病菌,操作简便且成本低、安全系数高、灵敏度高和测试时间短。

主权项:1.一种高细菌检测特异性的ATP荧光检测拭子,包括细菌富集搅拌棒和拭子外壳,其特征在于,所述拭子外壳包括拭子头部、密封棒、进液通道、搅拌棒卡槽和密封外壳;所述拭子头部为一空腔,所述密封棒位于拭子头部的空腔内;所述密封棒一端封闭,另一端伸出拭子头部与进液通道密封连接;所述进液通道的另一端设置有搅拌棒卡槽;所述细菌富集搅拌棒包括中空的棒体和棒头,所述中空的棒体靠近棒头的位置具有出液孔;所述细菌富集搅拌棒远离棒头的一端与所述搅拌棒卡槽卡接;所述密封外壳位于所述进液通道和所述细菌富集搅拌棒的外部,且两部分的密封外壳可拆卸连接;所述拭子头部装有pH为5.5~6.5的荧光素和荧光素酶的混合液;所述细菌富集搅拌棒的制备方法,包括如下步骤:1将聚二甲基硅氧烷搅拌棒插入金属有机框架ZIF-90纳米颗粒中,进行金属有机框架材料修饰;所述聚二甲基硅氧烷搅拌棒是将所述中空的棒体插入聚二甲基硅氧烷和固化剂乳化后的乳化液中,经固化得到;所述聚二甲基硅氧烷与固化剂的质量比为8~12:1;所述聚二甲基硅氧烷和固化剂的总质量与水的质量比为1~2:1;所述乳化的转速为500~1000rpm,时间为4~6min;所述中空的棒体插入所述乳化液中的深度为2~5cm;所述固化的温度为100~150℃,所述固化的时间为40~60min;所述金属有机框架ZIF-90纳米颗粒的制备方法为:将二水合醋酸锌的DMF溶液与咪唑-2-甲醛的DMF溶液混合反应,得到金属有机框架ZIF-90纳米颗粒;所述二水合醋酸锌的DMF溶液中二水合醋酸锌的浓度为0.2~0.6M,所述咪唑-2-甲醛的DMF溶液中咪唑-2-甲醛的浓度为0.4~1.2M;所述二水合醋酸锌的DMF溶液与咪唑-2-甲醛的DMF溶液的体积比为6-10:6-10;所述反应的转速为3000~5000rmin,时间为5~15min;所述金属有机框架材料修饰的时间为5~15min;2将所述金属有机框架材料修饰后的聚二甲基硅氧烷搅拌棒插入噬菌体混合溶液中进行噬菌体修饰;3将所述噬菌体修饰后的聚二甲基硅氧烷搅拌棒用牛血清白蛋白溶液封闭,得到细菌富集搅拌棒。

全文数据:

权利要求:

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