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申请/专利权人:黑玉星岩国际科学技术(北京)有限公司
摘要:本发明公开了一种胸腺肿瘤类器官构建方法及其培养液,该方法包括以下步骤:胸腺肿瘤2D扩增细胞培养将经过培养液重悬后接种到贴壁型细胞培养板或培养瓶中培养,得到胸腺肿瘤2D扩增细胞;酶解消化将胸腺肿瘤2D扩增细胞酶解消化,镜下观察细胞集落开始收缩时,终止消化,经离心、沉淀,得到胸腺肿瘤细胞团沉淀;胸腺肿瘤组织类器官培养胸腺肿瘤细胞团沉淀用胸腺肿瘤类器官培养液重悬,加入基质胶充分混匀,得到培养液‑基质胶‑细胞团混悬凝胶,静置孵育,每隔2~3天更换一次胸腺肿瘤类器官培养液,本发明的方法相比传统类器官培养方法,成功率更高,培养周期更短,适合细胞数量少、增殖缓慢的肿瘤类型,所形成的视野内大直径类器官的比例高。
主权项:1.一种用于胸腺肿瘤类器官构建的培养液,其特征在于,所述胸腺肿瘤类器官培养液由AdvancedDMEMF12,HEPES缓冲液浓度为10~15mM,GlutaMAX浓度为1~2mM,N2和B27混合液浓度为1~2%,Polydatin浓度为100~500ugml,EGF浓度为30~80ngml,HGF浓度为50~200ngml,FGF-10浓度为30~100ngml,Noggin浓度为100~500ngml,R-spondin1浓度为200~1000ngml,Wnt3a浓度为100~500ngml,Gastrinl浓度为5~50nM,A83-01浓度为1~5uM,CHIR-99021浓度为3~10uM,Forskolin浓度为5~10uM,Y-27632浓度为5~20uM,青霉素链霉素混合液浓度为1~5%组成。
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