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申请/专利权人:上海承葛生物科技有限公司
摘要:本发明是微生物中的一种提升粪便样本中菌群纯度的方法,所述方法纤维素酶对人体粪便的纤维素成分进行降解。本发明利用纤维素酶实现对人体粪便的纤维素成分降解,便于将处理后的粪便悬液制备成菌群胶囊。
主权项:1.一种提升粪便样本中菌群纯度的方法,其特征在于所述方法利用纤维素酶对人体粪便的纤维素成分进行降解,具体包括如下步骤:步骤1,获取粪便样本,步骤2,配置无菌均质液,称取NaCl晶体,加入超纯水中搅拌溶解,再称取维生素C加入NaCl溶液中搅拌溶解;将溶液定容至10L即为均质液,使NaCl终浓度为0.8-1.0%、维生素C终浓度为0.0002-0.005%;步骤3.纤维素酶制备;将含有20g·L-1的滤纸碎片的改良Mandels营养液,灭菌后冷却至室温,然后接入里氏木霉菌液,于摇床中发酵三天;然后将发酵液通过离心机进行离心处理,取上清液再次通过滤膜以除去菌体得到滤液,将滤液通过超滤进行浓缩即得到纤维素酶;步骤4.样本处理;将纤维素酶按照粪便重量的质量百分比2%-7%的浓度添加到无菌均质液,然后往粪便样本中加入无菌均质液,并于密闭环境下用搅拌机搅拌均质;步骤5.菌体收集;将步骤3中均质好的粪便悬液依次通过20-400目的筛网,将滤液收集新的干净容器中,并用离心机离心处理滤液;离心后弃去离心上清液,并用等量生理盐水重悬菌泥;将菌泥用生理盐水稀释100倍后用LIVEDEADTMBacLightTMBacterialViabilityKit死活荧光染料染色,之后利用流式细胞术检测样本活性。
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百度查询: 上海承葛生物科技有限公司 一种提升粪便样本中菌群纯度的方法
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