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申请/专利权人:北京承大科技投资管理有限公司
摘要:本发明公开了一种脐血间充质干细胞来源外泌体的纳米胶囊化方法,涉及外泌体包裹技术领域,技术方案为,包括S1将脐带血稀释后离心分离单个核细胞;S2将所述单个核细胞进行培养;S3提取所述培养细胞的外泌体;S4制备丝素蛋白溶液并进行改性;S5将所述外泌体与改性后的丝素蛋白溶液混合以形成纳米胶囊化;S6稳定纳米胶囊化外泌体;S7收集、洗涤并储存所述纳米胶囊化外泌体,本发明通过纳米胶囊化技术显著提高了外泌体的稳定性,保护其免受外界因素破坏,维持功能性和完整性,对药物递送和再生医学应用至关重要,优化的制备工艺确保有效封装和控制释放,这一创新为药物递送和再生医学领域的应用开辟了新途径。
主权项:1.一种脐血间充质干细胞来源外泌体的纳米胶囊化方法,其特征在于,包括以下步骤:S1)将脐带血稀释后离心分离单个核细胞;S2)将所述单个核细胞进行培养;S3)提取所述培养细胞的外泌体;S4)制备丝素蛋白溶液并进行改性:具体步骤为:将丝素蛋白溶解在PBS缓冲溶液中,质量体积浓度为1-2%,使用乙酸逐滴调整丝素蛋白溶液的pH至4.0,然后将NaCl溶液缓慢加入到丝素蛋白溶液中,浓度为100-200mM,在室温下静置溶液4-12小时,得到激活的丝素蛋白溶液,向丝素蛋白溶液中加入N-羟基琥珀酰亚胺NHS和1-乙基-3-3-维甲基氨丙基碳二亚胺EDC,加入摩尔比为1:1,浓度为5-10mM,反应30分钟-1小时,将RGD肽段溶解在PBS中得到肽段溶液,浓度为1-5mgmL,然后将肽段溶液加入到激活后的丝素蛋白溶液中,体积比为1:1-1:4,反应2-4小时,S5)将所述外泌体与改性后的丝素蛋白溶液混合以形成纳米胶囊化:具体步骤为:将提取的外泌体与改性后的丝素蛋白溶液按照1:10-1:20的体积比混合,静置2小时;S6)稳定纳米胶囊化外泌体:具体步骤为:加入鞣酸至质量体积浓度为0.1-0.5%,在室温下反应1-2小时,通过1,000g离心10分钟,4°C收集纳米胶囊化的外泌体;S7)收集、洗涤并储存所述纳米胶囊化外泌体。
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权利要求:
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