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申请/专利权人：天津健力科技研发有限公司

摘要：本发明涉及海参深加工技术领域，具体涉及一种高钙高蛋白海参肽及其制备方法，包括预处理、酶解、助剂辅助提取、升温灭酶、分离纯化和浓缩干燥等步骤。柠檬酸与金属离子钙发生络合形成金属‑柠檬酸络合物以提高对微量元素钙的提取率，改性壳聚糖通过物理吸附和化学作用将海参肽缠绕和包裹起来形成一个微胶囊，保护海参肽不被外界环境中的酶或其他分解物质破坏的同时也有助于酶解产物的分离与纯化，柠檬酸提供的酸性环境促进了蛋白质的溶解，改性壳聚糖吸附提取液中的氨基酸和金属‑柠檬酸络合物，柠檬酸的酸性基团与壳聚糖的碱性基团相互作用形成稳定的复合物有助于保持海参肽的三维结构，这种协同效应有效地保护和稳定了这些活性成分。

主权项：1.一种高钙高蛋白海参肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S11.预处理：取新鲜海参，将内脏与杂物去除后洗净得到海参壁，将海参壁研磨破碎后放入纯化水中并进行超声，海参壁与纯化水的质量比为1：（1.5~3），超声频率40~50kHz，超声温度5~20℃，超声2~3h后得到海参壁匀浆液；S12.酶解：搅拌状态下在海参壁匀浆液中加入复合酶溶液，所述复合酶溶液是胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的复配，胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶按重量份比为1.5~3：1.5~3：1~2，海参壁浆液与复合酶溶液的质量比为（1~1.5）：（2~3），同时用Tris-HCl缓冲液控制pH在7.5~8.5，反应温度35~50℃，反应时间8~12h，得到第一混合溶液；S13.助剂辅助提取：在搅拌状态下依次往第一混合溶液中加入柠檬酸水溶液和改性壳聚糖，搅拌温度35~50℃，反应时间4~5h，得到第二混合溶液；所述助剂辅助提取中海参壁、柠檬酸和改性壳聚糖按重量份比为1~1.2：1.5~3：2~3；S14.升温灭酶：在搅拌状态下，将第二混合溶液在温度为80~100℃的条件下处理15~25min，冷却至室温后得到第三混合溶液；S15.分离纯化：将第三混合溶液进行离心分离，离心转速6000~8000rpmmin，离心5~10min后分离得到上清液和滤渣，在上清液中加入活性炭进行脱色脱腥处理后通过截留相对分子质量为6000~10000的中空纤维素膜，在0.15~0.25MPa的压力下进行超滤，得到海参肽液；S16.浓缩干燥：将海参肽液进行冷冻干燥，冷冻温度-10~0℃，冷冻时间20~25h，得到片状海参肽，将片状海参肽在低温状态下粉碎即得海参肽粉；所述改性壳聚糖的比表面积在60~80m2g且其表面具有羧基基团；所述改性壳聚糖的制备方法包括：S21.将壳聚糖与十二烷基硫酸钠（C12H25SO4Na）分别溶于质量分数为1~2.5%的冰乙酸（CH3COOH），得到壳聚糖溶液和十二烷基硫酸钠溶液；S22.在搅拌状态下将壳聚糖溶液缓慢滴加到十二烷基硫酸钠溶液中，搅拌4~5h，并采用质量分数为1~1.5%的氢氧化钠溶液调节溶液pH至中性，过滤、清洗、干燥后得到中间产物；S23.在搅拌状态下往纯化水中依次加入柠檬酸（C6H8O7）和磷酸二氢钠（NaH2PO4），搅拌温度55~70℃，搅拌时间2~4h，得到柠檬酸混合液；S24.在搅拌状态下向柠檬酸混合液中加入中间产物，反应温度55~70℃，反应时间2~4h，过滤、清洗、干燥得到粗产物；S25.将所述粗产物放在10~15%氨基丁三醇甲醇溶液中洗脱除去十二烷基硫酸钠，洗涤干燥至恒重，粉碎后得到改性壳聚糖。

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