申请/专利权人：桂林电子科技大学

申请日：2022-12-09

公开（公告）日：2024-05-07

公开（公告）号：CN115825184B

主分类号：G01N27/30

分类号：G01N27/30;G01N27/26;G01N27/416

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.07#授权;2023.04.07#实质审查的生效;2023.03.21#公开

摘要：一种基于纳米复合材料和适配体用于检测高尔基体蛋白73的电化学传感器，以GP73适配体为识别分子，利用还原性氧化石墨烯‑二茂铁‑四氧化三锰RGO‑Fc‑Mn3O4纳米复合材料良好的电子传递效应，优异的负载能力和极佳的电化学活性，和GP73适配体能够特异性识别和结合GP73蛋白，构建一种能对GP73蛋白进行特异性识别以及定量分析的适配体传感器，用以检测血清中GP73的含量。该方法操作简单、省时、费用低，最低检测限为0.01ngmL。

主权项：1.一种基于纳米复合材料和适配体构建电化学传感器用于检测高尔基体蛋白73的方法，按以下步骤进行：步骤1：还原氧化石墨烯-二茂铁-四氧化三猛RGO-Fc-Mn3O4纳米复合材料的制备1还原氧化石墨烯RGO的制备：氧化石墨烯GO倒入蒸馏水中，破碎均匀，加入抗坏血酸AA还原，得RGO溶液；2还原氧化石墨烯-二茂铁RGO-Fc的制备：在RGO溶液中加入二茂铁甲酸溶液、乙醇，搅拌反应，得RGO-Fc；3四氧化三锰Mn3O4的制备：四水氯化锰粉末和聚乙烯吡咯烷酮PVP加入纯水混合并搅拌加热；NaOH溶液与氯化锰溶液混合搅拌、离心、洗涤，得Mn3O4溶液；4还原氧化石墨烯-二茂铁-四氧化三猛RGO-Fc-Mn3O4纳米复合材料的制备：将RGO-Fc混合液与Mn3O4溶液加入PVP，搅拌反应，离心，得RGO-Fc-Mn3O4；步骤2：电极的修饰与适配体传感器的构建1金@邻苯二胺丝网印刷电极Au@POPDSPE的修饰：把丝网印刷电极SPE放置在稀硫酸溶液中，循环伏安扫描，得到活化丝网印刷电极；活化的丝网印刷电极浸泡在HAuCl4和OPD的混合溶液中，进行恒电位沉积，冲洗吹干，得到Au@POPDSPE；2还原氧化石墨烯-四氧化三猛-二茂铁金@邻苯二胺丝网印刷电极RGO-Fc-Mn3O4Au@POPDSPE传感界面的制备：往所得的Au@POPDSPE滴加RGO-Fc-Mn3O4溶液，孵育，冲洗，吹干；得到RGO-Fc-Mn3O4Au@POPDSPE；3GP73适配体还原氧化石墨烯-四氧化三猛-二茂铁金@邻苯二胺纳米颗粒丝网印刷电极GP73AptRGO-Fc-Mn3O4Au@POPDSPE电化学适配体传感器的构建：将GP73Apt溶液滴在RGO-Fc-Mn3O4Au@POPDSPE界面上，放进振荡培养箱孵育一定时间，用纯水冲洗，吹干，在传感界面滴加牛血清蛋白BSA溶液，晾干，得到GP73AptRGOFc-Mn3O4Au@POPDSPE电化学适配体传感器；步骤3：GP73的工作曲线绘制1将标准GP73溶液滴加到步骤2得到的GP73AptRGO-Fc-Mn3O4Au@POPDSPE传感界面，反应一定时间，用纯水洗涤，得到工作电极，晾干备用；2将工作电极放入磷酸缓冲溶液PBS中，采用电化学工作站的差分脉冲扫描法DPV扫描，记录其峰电流；3分别对不同浓度的GP73进行检测，绘制工作曲线；步骤4：实际血清样本中GP73的检测1将医院收集的人血清样本已通过酶联免疫吸附法ELISA获得GP73浓度，滴加到在步骤2制备的GP73AptRGO-Fc-Mn3O4Au@POPDSPE传感界面，反应一定时间，洗涤，得到工作电极，晾干备用；2将工作电极放入5mLPBs溶液中，采用电化学工作站的DPV扫描，记录其峰电流；3根据步骤3所述工作曲线，计算待测实际样品中GP73的浓度。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 桂林电子科技大学 一种基于纳米复合材料和适配体用于检测高尔基体蛋白73的电化学传感器

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