龙图腾网&IPTOP
- 微信扫码登录
- 账号密码登录
- 短信登录/注册
申请/专利权人：河南大学
申请日：2024-03-26
公开（公告）日：2024-05-10
公开（公告）号：CN118000165A
主分类号：A01K67/033
分类号：A01K67/033;C12N15/113;C12N9/22;C12N15/89
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.05.28#实质审查的生效;2024.05.10#公开
摘要：本发明属于基因工程技术领域，涉及病虫害防治，特别是指一种构建飞蝗雄虫体色Marker基因YellowProtein纯合突变体的方法及其应用。本发明以飞蝗YP基因的序列鉴定和功能研究为目的，利用飞蝗基因组序列和RACE技术，克隆了飞蝗YP基因全长序列，表达谱鉴定了YP基因在成虫头部、表皮、背板特异性高表达，对飞蝗YP基因进行了敲除，通过筛选构建了飞蝗YP纯合突变体。当突变体羽化至成虫后，发现雄虫相较于野生型体色没有出现变黄的现象，生测发现雄虫在求偶交配行为方面表现在求偶欲望下降，拒绝交配等表型。进一步确认了YP纯合体中YP基因功能缺失。YP纯合体的构建为其他飞蝗的研究提供了表型明显的Marker基因和基因功能的研究思路，同时也为飞蝗的绿色防控提供理论基础和应用潜力。
主权项：1.一种构建飞蝗雄虫体色Marker基因YellowProtein纯合突变体的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）在飞蝗YellowProtein基因的2号外显子和5号外显子上各设计一个sgRNA靶标位点，通过体外转录合成sgRNA；（2）步骤（1）的sgRNA与Cas9蛋白体外融合形成RNP混合物，经显微注射注入飞蝗卵，获得飞蝗突变体；（3）提取步骤（2）的飞蝗突变体基因组后，利用靶点检测引物进行PCR检测，并对PCR产物进行测序，筛选突变检测成功的飞蝗突变体作为G0代突变体；（4）G0代突变体与野生型个体进行杂交得G1代，重复步骤（3）的检测，筛选得到G1代突变体；G1代突变体与野生型个体进行杂交得G2代，重复步骤（3）的检测，筛选得到G2代突变体；（5）G2代突变体经突变检测成功后，将雌雄突变类型一致的G2代突变体进行自交，得到G3代个体，筛选G3代个体中的纯合突变体经自交后获得飞蝗YellowProtein纯合突变体种群。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 河南大学 一种构建飞蝗雄虫体色Marker基因Yellow Protein纯合突变体的方法及其应用
免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。
主营中国专利交易买卖与专利转让许可,高校科技成果推广与科技成果转化,知识产权运营管理与平台开发,科技人才专家库与科技猎头等科技服务
开放平台
担保交易
惠及多方
会员特惠
专属平台
适合多方
数据共享
功能齐全
皖公网安备 34010402703815号