申请/专利权人：孟山都技术公司

申请日：2020-05-28

公开（公告）日：2024-06-04

公开（公告）号：CN113939189B

主分类号：C12N15/82

分类号：C12N15/82;A01H5/10;A01H1/06;A01H6/46

优先权：["20190529 US 62/854,142","20190814 US 62/886,732"]

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.04#授权;2022.06.07#实质审查的生效;2022.01.14#公开

摘要：本公开提供了用于改变玉米或其他谷类植物中的赤霉素GA含量的组合物和方法。还提供了用于通过编辑特定GA20氧化酶基因或基因座以产生基因组缺失或破坏来改变与赤霉素生物合成相关的基因的表达的方法和组合物，所述基因组缺失或破坏致使所述GA20氧化酶基因的反义序列处于相邻SAMT基因启动子的控制下。还提供了具有降低一种或多种GA氧化酶基因的表达或活性的显性等位基因的经修饰植物细胞和植物，所述经修饰植物细胞和植物包含降低的赤霉素水平和改善的特征，诸如降低的植物高度和增加的倒伏抗性，但不具有异型。

主权项：1.一种用于产生包含内源性GA20氧化酶_5基因座的突变等位基因的经修饰玉米植物的方法，所述方法包括：a.使用靶向编辑技术在玉米细胞中产生第一和第二双链断裂DSB，其中所述第一DSB在选自由以下组成的组的区域中：所述内源性GA20氧化酶_5基因座的包含与SEQIDNO:11至少99%相同的序列的5′UTR、包含与SEQIDNO:12至少99%相同的序列的第1外显子、包含与SEQIDNO:13至少99%相同的序列的第1内含子、包含与SEQIDNO:14至少99%相同的序列的第2外显子、包含与SEQIDNO:15至少99%相同的序列的第2内含子、包含与SEQIDNO:16至少99%相同的序列的第3外显子、包含与SEQIDNO:17至少99%相同的序列的3′UTR，以及包含与SEQIDNO:18至少99%相同的序列的内源性Zm.GA20氧化酶_5基因与内源性Zm.SAMT基因之间的基因间区域；其中所述第二DSB在选自由以下组成的组的区域中：内源性Zm.SAMT基因座的包含与SEQIDNO:35和或SEQIDNO:37至少99%相同的序列的5′UTR、包含与SEQIDNO:34至少99%相同的序列的第1外显子、包含与SEQIDNO:36至少99%相同的序列的第1内含子、包含与SEQIDNO:32至少99%相同的序列的第2外显子、包含与SEQIDNO:33至少99%相同的序列的第2内含子、包含与SEQIDNO:30至少99%相同的序列的第3外显子、包含与SEQIDNO:31至少99%相同的序列的第3内含子、包含与SEQIDNO:28至少99%相同的序列的第4外显子、包含与SEQIDNO:29至少99%相同的序列的第4内含子、包含与SEQIDNO:26至少99%相同的序列的第5外显子、包含与SEQIDNO:27至少99%相同的序列的第5内含子、包含与SEQIDNO:24至少99%相同的序列的第6外显子、包含与SEQIDNO:25至少99%相同的序列的第6内含子、包含与SEQIDNO:22至少99%相同的序列的第7外显子、包含与SEQIDNO:23至少99%相同的序列的第7内含子、包含与SEQIDNO:20至少99%相同的序列的第8外显子、包含与SEQIDNO:19至少99%相同的序列的3′UTR，以及包含与SEQIDNO:18至少99%相同的序列的所述内源性Zm.GA20氧化酶_5基因与所述内源性Zm.SAMT基因之间的所述基因间区域；b.从所述玉米细胞发育或再生成包含基因组缺失的玉米植物或其植物部分，其中所述基因组缺失由所述第一DSB和所述第二DSB侧接，其中所述突变等位基因包含基因组修饰，所述基因组修饰缺失或破坏所述内源性Zm.SAMT基因座的转录终止序列，并且或者缺失所述内源性Zm.GA20氧化酶_5基因与Zm.SAMT基因之间的所述基因间区域的至少一部分，并且其中所述靶向编辑技术包括使用至少一种位点特异性核酸酶。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 孟山都技术公司 用于使用基因组编辑产生显性矮株型等位基因的方法和组合物

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