申请/专利权人：四川农业大学

申请日：2022-06-15

公开（公告）日：2024-06-04

公开（公告）号：CN115074382B

主分类号：C12N15/82

分类号：C12N15/82;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/46;A01H1/02;A01H1/04

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.04#授权;2022.10.11#实质审查的生效;2022.09.20#公开

摘要：本发明公开一种水稻隐性雄性不育系的繁育方法，涉及杂交水稻育种技术领域。本发明将水稻隐性雄性育性恢复元件、花粉致死元件、除草剂A抗性筛选元件和除草剂B敏感性筛选元件构建四元转基因元件连锁表达载体，转化入具有除草剂B抗性的不育系中，获得对除草剂A有抗性同时对除草剂B敏感的保持繁殖两用系；采用对应类型除草剂对保持繁殖两用系自交结实的种子进行筛选去除其中的保持繁殖两用系或不育系，从而对不育系或保持繁殖两用系进行去杂提纯。该方法可以应用于于第三代杂交水稻繁种和制种中含有转基因成分的保持繁殖两用系或者不含有转基因成分的不育系的提纯去杂，操作简单、高效。

主权项：1.一种水稻隐性雄性不育系的繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将水稻隐性雄性育性恢复元件、花粉致死元件、除草剂A抗性筛选元件和除草剂B敏感性筛选元件构建四元转基因元件连锁表达载体；S2：将S1得到的四元转基因元件连锁表达载体转化入对应水稻隐性雄性不育材料中，获得保持繁殖两用系；S3：将S2得到的保持繁殖两用系自交结实，其自交后代中包括不含所述四元转基因元件的不育系和含有所述四元转基因元件的保持繁殖两用系；S4：将S3得到的保持繁殖两用系自交结实种子采用对应类型除草剂进行筛选，通过施用除草剂A进行筛选，去除不具有除草剂A抗性的不育系，提纯具有除草剂A抗性的保持繁殖两用系；可以通过施用除草剂B进行筛选，去除丧失了除草剂B抗性的保持繁殖两用系，提纯具有除草剂B抗性的不育系；所述除草剂A抗性筛选元件由启动子、除草剂抗性筛选标记基因编码区及终止子依序可正常工作的相连；所述除草剂B敏感性筛选元件由启动子、除草剂显性敏感构建及终止子依序可正常工作的相连；所述除草剂抗性筛选标记基因编码区为BAR，对应除草剂类型为草铵膦类除草剂，来源于细菌的BAR基因赋予水稻对草铵膦类除草剂抗性；所述除草剂显性敏感构建基于RNAi沉默技术的RNAi沉默元件；所述RNAi沉默元件由水稻内源除草剂抗性基因OsHIS1的CDS序列和其反向互补序列以及PDKintron序列通过同源重组反应一起连入RNAi沉默载体pKannibal后得到；通过水稻片段的引物扩增获得：扩增水稻OsHIS1的CDS片段的引物为：OsHIS1-Sence-F:GAGGACACGCTCGAGGAATTCGCACCCTCTTGACGATTCTTCOsHIS1-Sence-R:TTCCTTACCAATTGGGGTACCCACGCTGTATAACATGGCCAb）扩增水稻OsHIS1的CDS片段反向互补序列的引物为：OsHIS1-Antisence-F:AAGCAGGACTCTAGAGGATCCCACGCTGTATAACATGGCCAOsHIS1-Antisence-R:GGGTTCGAAATCGATAAGCTTGCACCCTCTTGACGATTCTTC所述水稻内源除草剂抗性基因OsHIS1对应类型除草剂为β-三酮类除草剂（β-Triketoneherbicides），所述β三酮类除草剂包括磺草酮（Sulcotrione）、呋喃磺草酮（Tefuryltrione）、甲基磺草酮（Mesotrione）、双环磺草酮（Benzobicyclon）和环磺酮Tembotrione中的任意一种或几种；所述S1中水稻隐性雄性育性恢复元件由水稻隐性雄性育性恢复基因的启动子、基因编码区和终止子依序可正常工作的相连；所述水稻雄性育性恢复基因为OsSTRL2，所述OsSTRL2通过设计引物扩增水稻OsSTRL2的基因片段，获得水稻隐性雄性育性恢复元件pOsSTRL2-OsSTRL2-T；扩增水稻OsSTRL2的基因片段的引物为OsSTRL2-F:TCCAGATCGTCGACCTGCAGGTATGCACTTTGTTATATTACOsSTRL2-R:TCCGGTGCAGATCCCTGCAGGACCTGTGCTGTCCTGCTC；所述水稻隐性雄性不育系为具有除草剂B抗性的水稻隐性雄性不育系。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 四川农业大学 一种水稻隐性雄性不育系的繁育方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD