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一种由特异核苷酸序列引导的缺刻酶介导的DNA组装载体及其应用 

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申请/专利权人:华南农业大学

摘要:本发明公开了一种由特异核苷酸序列引导的缺刻酶介导的DNA组装载体及其应用。本发明所述DNA组装载体包含一个由特异核苷酸序列、具有筛选标记功能的基因表达盒和缺刻酶位点组成的一种由特异核苷酸序列引导的缺刻酶组装元件UNiE,可用于长片段DNA克隆和多基因片段的高效组装。本发明同时将UNiE元件与多基因叠加系统TGSII相结合,构建了一个组装效率更高的新型多基因叠加系统TGSII‑UNiE,实现了对多基因的高效组装,具有效率高、操作简便和成本低的特点。

主权项:1.一种由特异核苷酸序列引导的缺刻酶组装元件,其特征在于,所述元件中包含一个具有筛选标记功能的基因表达盒,基因表达盒两侧连接有不同的特异核苷酸序列,基因表达盒和特异核苷酸序列的正向序列和反向互补序列的3’端均存在缺刻酶识别位点;所述特异核苷酸序列为UA1~UA5或UA21任一所述的15个碱基的单链核苷酸序列,UA1~UA5的核苷酸序列依次如SEQIDNO.2~6所示,UA21的核苷酸序列依次如SEQIDNO.22所示;所述缺刻酶识别位点为缺刻酶Nt.BtsI的识别位点,其序列如SEQIDNO.23所示。

全文数据:

权利要求:

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