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申请/专利权人：中国药科大学
申请日：2024-04-17
公开（公告）日：2024-06-21
公开（公告）号：CN118222673A
主分类号：C12Q1/6806
分类号：C12Q1/6806
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.21#公开
摘要：本发明涉及一种血浆游离DNA甲基化一步转化的试剂盒及使用方法，所述试剂盒包括如下组件：蛋白酶k溶液、羟基磁珠溶液、裂解结合液、亚硫酸氢盐转化液、结合液、脱磺液、洗涤液、洗脱液。本发明所述试剂盒灵活的将游离DNA的提取和转化过程合二为一，先富集转化，再纯化浓缩。如此既节省了转化游离DNA的时间，又可以避免在提取过程中游离DNA的损耗。另外，本发明所述试剂盒采用超顺磁性纳米磁珠及硅胶离心柱对游离DNA进行富集和回收，操作简单，效果好。综上所述，本发明所述方法具有成本低、操作简短、转化率及回收率高等优点，为后续的甲基化特异性PCRMSP扩增、亚硫酸氢盐测序等实验提供了高纯度的样品。
主权项：1.一种血浆游离DNA甲基化一步转化方法，其特征在于，包括如下步骤：1裂解结合：向血浆样品中加入蛋白酶k进行消化，同时加入超顺性纳米磁珠和裂解结合液进行游离DNA吸附；2洗脱转化：将步骤1中磁珠吸附的游离DNA洗脱下来，进行亚硫酸氢盐转化；3转化后回收：将步骤2及结合液加入硅胶离心柱，吸附转化后的游离DNA即BiscfDNA；4洗涤纯化：对步骤3中脱磺化后的BiscfDNA进行洗涤纯化；5洗涤脱磺：向步骤4中离心柱吸附的BiscfDNA加入脱磺液，进行脱磺化；6洗涤纯化：对步骤5中脱磺化后的BiscfDNA进行洗涤纯化；7洗涤纯化：对步骤6中脱磺化后的BiscfDNA进行洗涤纯化；8晾干洗脱：将步骤7中纯化后的BiscfDNA加入洗脱液，进行洗脱。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国药科大学 一种血浆游离DNA甲基化快速提取转化方法及试剂盒
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