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【发明授权】一种生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌及其构建方法_云南农业大学_202310174396.0 

申请/专利权人:云南农业大学

申请日:2023-02-28

公开(公告)日:2024-06-21

公开(公告)号:CN116396876B

主分类号:C12N1/19

分类号:C12N1/19;C12N15/81;C12N15/56;C12N15/61;C12N15/54;C12N15/53;C12P33/20;C12R1/865

优先权:["20221117 CN 2022114614588"]

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.21#授权;2023.07.25#实质审查的生效;2023.07.07#公开

摘要:本发明涉及一种生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌及其构建方法,属于分子生物学和生物工程技术领域。所述的生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌是在产原人参二醇的起始菌株ZW04BY酿酒酵母中敲除β‑葡萄糖苷酶EGH1,过表达葡萄糖磷酸变位酶1、葡萄糖磷酸变位酶2和UDP‑葡萄糖焦磷酸化酶,糖基转移酶Pn1‑31、糖基转移酶PnUGT53、糖基转移酶PnUGT50和原人参二醇合成酶PPDS。本发明获得的酿酒酵母工程菌能够利用葡萄糖发酵生产人参皂苷Rd,产量为56.68±16.21mgL;酵母生长繁殖较快,仅需发酵罐就可以生产,为人工细胞高效合成人参皂苷Rd奠定了基础。

主权项:1.一种生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌,其特征在于,在产原人参二醇的起始菌株ZW04BY酿酒酵母中敲除β-葡萄糖苷酶EGH1,过表达葡萄糖磷酸变位酶1、葡萄糖磷酸变位酶2和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶,糖基转移酶Pn1-31、优化后的糖基转移酶PnUGT53、糖基转移酶PnUGT50和原人参二醇合成酶PPDS;所述糖基转移酶PnUGT50的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示;所述葡萄糖磷酸变位酶1的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;所述葡萄糖磷酸变位酶2的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示;所述UDP-葡萄糖焦磷酸化酶如SEQIDNO.4所示;所述糖基转移酶Pn1-31的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示;所述优化后的糖基转移酶PnUGT53的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示;原人参二醇合成酶PPDS的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 云南农业大学 一种生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌及其构建方法

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