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申请/专利权人：河南省健康元生物医药研究院有限公司
申请日：2022-07-27
公开（公告）日：2024-06-21
公开（公告）号：CN115232856B
主分类号：C12Q1/04
分类号：C12Q1/04;G01N21/80;G01N30/02;C12R1/75
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.21#授权;2022.11.11#实质审查的生效;2022.10.25#公开
摘要：本发明公开了一种基于固体发酵的产黄支顶孢霉高通量筛选方法，属于高通量筛选和工业微生物菌种选育技术领域，包括如下步骤：1取待筛选产黄支顶孢霉单菌落，制成单菌落混悬液，并使用亚精胺进行培养前处理；2将处理后的单菌落混悬液涂布于添加有pH指示剂的固体发酵培养基上，进行培养；3培养后根据固体发酵培养基的颜色变化筛选产黄支顶孢霉；头孢菌素C产量与发酵后pH值呈负相关。本发明方法培养及筛选过程简便、快捷，筛选效率高，适于推广应用。
主权项：1.一种基于固体发酵的产黄支顶孢霉高通量筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：1取待筛选产黄支顶孢霉单菌落，制成单菌落混悬液，并使用亚精胺进行培养前处理；2将处理后的单菌落混悬液涂布于添加有pH指示剂的固体发酵培养基上，进行培养；3培养后根据固体发酵培养基的颜色变化筛选产黄支顶孢霉；头孢菌素C产量与发酵后pH值呈负相关；步骤1中，所述待筛选产黄支顶孢霉包括经诱变育种获得的突变株，经遗传改造策略改造后的基因突变株，或由于菌种退化需要进行复壮的分离单菌株；步骤2中，所述固体发酵培养基配方为：果糖，20～30gL；可溶性淀粉，15～30gL；金枪鱼膏，15～25gL；DL-甲硫氨酸，10～15gL；硫酸铵，15～25gL；聚蛋白胨，20～30gL；MgSO4·7H2O，2～3gL；FeSO4·7H2O，1～2gL；玉米浆，10～15mLL；α-淀粉酶0.1～0.2gL；琼脂糖，10～15gL；pH＝7.20±0.05；步骤3中，对于头孢菌素C产量发生正突变的潜力高产产黄支顶孢霉而言，发酵后pH降至5.50±0.30；固体发酵培养基中添加0.2mmolL的儿茶酚紫指示剂。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 河南省健康元生物医药研究院有限公司 一种基于固体发酵的产黄支顶孢霉高通量筛选方法
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