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一种提高大肠杆菌诱导菌密度的方法 

申请/专利权人:江苏泰康生物医药有限公司

申请日:2022-12-28

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN118256369A

主分类号:C12N1/20

分类号:C12N1/20;C12R1/19

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.28#公开

摘要:本方法涉及生物技术领域,具体涉及一种提高大肠杆菌诱导菌密度的方法。采用梯度升温诱导的制备工艺,提供一种高密度发酵方法,极大的提高了菌体发酵密度,提高了外源蛋白表达量,批次间可重复性好,具有良好的产业应用前景。

主权项:1.一种提高大肠杆菌诱导菌密度的方法,其特征在于,包括如下步骤:1摇瓶培养:将检定合格的工作种子库种子液以0.1%~0.3%接种量接种至LB种子培养基中摇床培养,得到摇瓶种子液;2种子罐培养:将步骤1中获得的摇瓶种子液以6%~8%的接种量接种至初始发酵罐中培养,得到种子罐种子液;3发酵罐培养:将步骤2中获得的种子罐种子液以6%~8%的接种量接种至放大发酵罐中培养,通过调节搅拌转速和通气量控制溶氧在30%以上,培养至OD600达6.0后,每小时流加3-6%初始体积或初始重量的FeedD,直至发酵结束;4诱导表达:在步骤3培养至OD600达20.0后进行诱导表达。

全文数据:

权利要求:

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