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杂交全LNA寡核苷酸 

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申请/专利权人:豪夫迈·罗氏有限公司

摘要:本报告涉及杂交完全由锁核酸LNA单体组成的单链ss‑寡核苷酸。本文件展示成对完全互补ss‑寡核苷酸的杂交实验,所述成对完全互补ss‑寡核苷酸在给定的时间间隔内无法形成双链体。本报告提供鉴定此类不相容寡核苷酸对的方法。在另一方面,本报告提供能够快速形成双链体的成对互补ss‑寡核苷酸。本报告还提供了鉴定和选择相容寡核苷酸对的方法。在另一方面,本报告提供相容寡核苷酸对作为结合配偶体在结合测定例如在免疫测定中的用途。

主权项:1.一种用于提供结合对的方法,所述结合对由第一单链LNA寡核苷酸和第二单链LNA寡核苷酸组成,所述两个寡核苷酸能够在20℃至40℃的温度下形成8个至15个连续Watson-Crick碱基对的反平行双链体,所述方法包括以下步骤:a提供由8个至15个锁核酸=LNA单体组成的第一单链寡核苷酸,每个单体包含核碱基,所述第一单链寡核苷酸的核碱基形成第一核碱基序列;b提供由8个至15个LNA单体组成的第二单链寡核苷酸,所述第二单链寡核苷酸由至少与所述第一单链寡核苷酸数量相同的单体组成,所述第二单链寡核苷酸的每个单体均包含核碱基,所述第二单链寡核苷酸的核碱基形成所述第二单链寡核苷酸的第二核碱基序列,所述第二核碱基序列包含以反平行取向与所述第一核碱基序列互补的核碱基序列或由其组成,并且在理论上表明所述第一和第二单链寡核苷酸具有彼此形成双链体的能力,所述双链体由8个至15个连续Watson-Crick碱基对组成;c在20℃至40℃的温度下在水溶液中混合并温育相等摩尔量的所述第一和第二单链寡核苷酸1s至5min的时间间隔,从而获得单链寡核苷酸混合物或含双链体混合物;然后d在20℃至40℃的温度下分离在步骤c中获得的混合物,然后检测和定量分离的双链体,前提是所述分离的双链体存在,以及检测和定量分离的单链寡核苷酸;然后e如果在步骤d中可检测到双链体存在,并且如果双链体的摩尔量高于单链寡核苷酸的摩尔量,则选择此结合对;从而提供所述结合对,其中所述结合对选自以下的组:5’tgctcctg3’和5’caggagca3’,5’gcctgacg3’和5’cgtcaggc3’,5’ctgcctgacg3’和5’cgtcaggcag3’,5’gactgcctgacg3’和5’cgtcaggcagtc3’,5’tgctcctgt3’和5’acaggagca3’,5’gtgcgtct3’和5’agacgcac3’,5’gttggtgt3’和5’acaccaac3’,5’caacacaccaac3’和5’gttggtgtgttg3’,5’acacaccaac3’和5’gttggtgtgt3’,和或5’acaccaac3’和5’gttggtgt3’。

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权利要求:

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