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申请/专利权人：南京大学

摘要：本发明公开了一种尺寸为亚毫米的DNA折纸晶体的制备方法，包括如下步骤：1制备A型八面体DNA折纸单体和B型八面体DNA折纸单体；2在八面体DNA折纸单体内部嵌入金纳米颗粒；3提高八面体DNA折纸单体的浓度；4选择恰当的温度，通过恒温生长的方式将八面体DNA折纸单体制备形成亚毫米三维DNA折纸晶体。本发明以恒温结晶的方式，实现了亚毫米级别的DNA折纸晶体的制备；实现了对DNA折纸晶体尺寸定性的控制。为制备基于DNA折纸晶体的功能化器件提供了更多的可能性。

主权项：1.一种尺寸为亚毫米的DNA折纸晶体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）制备A型八面体DNA折纸单体和B型八面体DNA折纸单体：将M13mp18环形长链DNA与144根短链DNA以摩尔比1：7.5-10的比例混合于1×TAE，12.5mM醋酸镁的缓冲溶液中，将混合溶液放置于PCR中，经历23h，从高温缓慢降温至低温，高温缓慢降至低温为从95℃缓慢降温至20℃；获得浓度为10nM的两种八面体DNA折纸单体，分别具有互补的stickyends，所述两种八面体DNA折纸单体为A型八面体DNA折纸单体和B型八面体DNA折纸单体；所述八面体DNA折纸单体的核苷酸序列如SEQNO：1、2、3、4、5…168；（2）在八面体DNA折纸单体内部嵌入金纳米颗粒：将表面修饰有DNA连接链的金纳米颗粒与DNA折纸单体按0.9：1的摩尔比混合后，从50℃缓慢降温至20℃，获得内部嵌入金纳米颗粒的八面体折纸单体；金纳米颗粒作为标志物嵌入八面体单体内部，方便后续表征；（3）提高八面体DNA折纸单体的浓度：将含有已嵌入金纳米颗粒的八面体单体的溶液转移至离心管中，每管离心管中含200μL的八面体DNA折纸单体溶液；将含有八面体DNA折纸单体溶液的离心管放置于在离心机中离心，八面体DNA折纸单体沉积于离心管底部，将离心管中的上清溶液用移液枪吸出后，加入的1×TAE，12.5mM醋酸镁的缓冲溶液，根据所需单体浓度将溶液定容至40-200μL，为了将八面体单体均匀分散到溶液中，会使用摇床对其进行4h的震荡；（4）制备亚毫米三维DNA折纸晶体：将A型八面体DNA折纸单体和B型八面体DNA折纸单体以1：1的比例混合；将混合溶液投入PCR，首先在50℃下保持30min，之后在所需的温度下保持75h-300h，恒温温度会根据单体浓度的不同有所调整，温度为41.2℃-42.2℃；最终再迅速降温至20℃，制得尺寸为亚毫米的DNA折纸晶体。

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