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一种肾前体细胞来源的分泌组及其制备方法和应用 

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申请/专利权人:同济大学;苏州吉美瑞生医学科技有限公司

摘要:本发明属于细胞生物技术领域,具体涉及一种肾前体细胞来源的分泌组及其制备方法和应用,包括:S1:细胞复苏:将肾前体细胞复苏接种于铺有基底胶的第一培养皿中进行培养;S2:细胞传代:待肾前体细胞生长至60‑100%汇合度时,传代接种于铺有基底胶的第二培养皿中继续培养;S3:上清收集:待肾前体细胞生长至60‑100%汇合度时,弃去上清液并清洗肾前体细胞,将肾前体细胞加入DMEM培养基继续培养,随后收集肾前体细胞上清液;S4:预处理:将肾前体细胞上清液离心后,得到肾前体细胞来源的分泌组。与现有技术相比,本发明解决现有技术中缺少无创、可重复且低成本的细胞来源的问题。

主权项:1.一种肾前体细胞来源的分泌组的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1:细胞复苏:将肾前体细胞复苏接种于铺有基底胶的第一培养皿中进行培养;S2:细胞传代:待步骤S1中肾前体细胞生长至60-100%汇合度时,传代接种于铺有基底胶的第二培养皿中继续培养;S3:上清收集:待步骤S2中肾前体细胞生长至60-100%汇合度时,弃去上清液并清洗肾前体细胞,将肾前体细胞加入DMEM培养基继续培养,随后收集肾前体细胞上清液;S4:预处理:将步骤S3收集的肾前体细胞上清液离心后,得到肾前体细胞来源的分泌组;所述的基底胶为蛋白浓度不低于1mgmL的MatrigelMatrix;步骤S1中,所述的肾前体细胞为由尿液中分离得到的人源肾前体细胞;步骤S2中,所述的传代接种按1:3-1:6的传代比进行;步骤S3中,所述的清洗为采用PBS缓冲液清洗肾前体细胞至少3次,肾前体细胞加入DMEM培养基后继续培养12-48小时;步骤S4中,所述的离心为于800-1000g的离心力下离心10-20min。

全文数据:

权利要求:

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