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申请/专利权人:中国农业科学院农产品加工研究所;黑龙江飞鹤乳业有限公司
摘要:本发明涉及蛋白质技术领域,尤其涉及一种鲜奶级高纯度α‑乳白蛋白的分离制备方法。本发明通过联合微滤以及阴离子交换层析纯化,制得了纯度极高的α‑乳白蛋白溶液,实现了鲜奶级高纯度α‑La乳基料的制备,且制备工艺简单,易于工业化应用,具有广阔的应用前景。
主权项:1.一种鲜奶级α-乳白蛋白的分离制备方法,其特征在于,包括:(1)将脱脂牛乳经过微滤收集透过液,然后将所述透过液浓缩除糖得到乳清蛋白液;(2)将所述乳清蛋白液通过阴离子交换层析柱进行纯化;所述微滤采用的滤膜为陶瓷膜,所述滤膜的孔径为50nm;所述阴离子交换层析柱的填料为DEAELargeScale;离子交换层析采用的洗脱液为盐溶液和缓冲液的混合液;所述盐溶液为0.5MNaCl溶液;所述缓冲液为20mM、pH为6.8的磷酸缓冲液;所述纯化的步骤包括:用所述磷酸缓冲液平衡所述阴离子交换层析柱,流速为2mLmin,所述阴离子交换层析柱的柱体积为25mL,平衡结束后以2mLmin上样,上样的乳清蛋白液为25mL,待样品流完后,用20mMpH6.8磷酸缓冲液以2mLmin流速洗掉未吸附蛋白,待未吸附蛋白峰洗出且基线平稳后,使用125mL的0.5MNaCl与125mL的20mMpH6.8磷酸缓冲液线性混合,并以2mLmin的流速洗下结合在层析柱上的α-乳白蛋白及β-乳球蛋白,收集2min10s~2min40s的洗脱组分。
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