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申请/专利权人：浙江工业大学
摘要：本发明公开了一种I‑E型CRISPRi系统及在构建高产D‑泛酸工程菌中的应用，本发明将Cas相关蛋白基因序列通过UTR12序列串联成为多顺反子结构以在翻译水平上提高蛋白的表达，通过替换表达Cascade效应物的启动子P43为木糖诱导型启动子PxylA，获得可控的I‑E型CRISPRi，通过不同诱导剂木糖浓度的添加实现抑制能力的控制。本发明在增强菌株D‑泛酸合成能力的基础上，运用I‑E型CRISPRi系统平衡菌株生长与D‑泛酸的生产，使得在无前体添加时D‑泛酸产量相较出发菌从检测限以下提高到12.8gL。该系统具有更小的细胞毒性与更广泛的PAM位点选择。
主权项：1.一种I-E型CRISPRi系统，其特征在于，所述系统包括Cascade蛋白和crRNA；所述Cascade蛋白由casA、casB、casC、casD、casE的开放阅读框上游依次用UTR12序列修饰并依次连接构成的mRNA翻译所生成，该mRNA由组成型启动子P43或木糖诱导型启动子PxylA表达；所述组成型启动子P43核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述木糖诱导型启动子PxylA核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述UTR12核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江工业大学 一种I-E型CRISPRi系统及在构建高产D-泛酸工程菌中的应用
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