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申请/专利权人：复旦大学
申请日：2023-03-30
公开（公告）日：2023-07-14
公开（公告）号：CN116426542A
主分类号：C12N15/34
分类号：C12N15/34;C12N15/70;C12N15/55;G01N33/53;G01N33/569;C12Q1/70;C12R1/93
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2023.08.01#实质审查的生效;2023.07.14#公开
摘要：本发明公开了用噬菌体单链制备技术体外重组cccDNA分子模型的方法及应用，方法包括R1、构建重组质粒，载体质粒插入部分λ噬菌体基因组，并构建入目标基因组序列；R2、制备单链形式cccDNA，将步骤R1构建的重组质粒转化入大肠杆菌并用VCSM13辅助噬菌体进行感染，包装出基因组上含有目标基因组全长序列的噬菌体，抽提M13噬菌体基因组并引入Zn2+切割后，获得单链形式的cccDNA；R3、体外重组cccDNA，将步骤R2获得的cccDNA正负链退火经连接酶连接修复，即为体外重组cccDNA分子模型；本发明通过噬菌体单链制备系统，经体外重组获得不含有外源序列的cccDNA分子模型的方法，为cccDNA的体内外特性研究提供了一个新技术平台。
主权项：1.一种利用噬菌体单链制备技术体外重组cccDNA分子模型的方法，其特征在于，包括以下步骤：R1、构建重组质粒，载体质粒插入部分λ噬菌体基因组，并构建入目标基因组序列；R2、制备单链形式cccDNA，将步骤R1构建的重组质粒转化入大肠杆菌并用VCSM13辅助噬菌体进行感染，包装出基因组上含有目标基因组全长序列的噬菌体，抽提M13噬菌体基因组并引入Zn2+切割后，获得单链形式的cccDNA；R3、体外重组cccDNA，将步骤R2获得的cccDNA正负链退火经连接酶连接修复，即为体外重组cccDNA分子模型。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 复旦大学 用噬菌体单链制备技术体外重组cccDNA分子模型的方法及应用
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