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【发明公布】一种重口裂腹鱼下丘脑细胞体外培养方法_中国长江三峡集团有限公司中华鲟研究所_202311116190.9 

申请/专利权人:中国长江三峡集团有限公司中华鲟研究所

申请日:2023-08-31

公开(公告)日:2023-11-14

公开(公告)号:CN117050944A

主分类号:C12N5/079

分类号:C12N5/079

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2023.12.01#实质审查的生效;2023.11.14#公开

摘要:本发明属于生物工程技术领域,公开了一种重口裂腹鱼下丘脑细胞体外培养方法,通过该发明可以获得数量多、纯度高的下丘脑细胞。一般细胞培养采用组织块牵引法,细胞培养周期长并且细胞数量少;再加上神经元细胞培养的特殊性,一般很难大量获得下丘脑神经元细胞。而且该发明方法通过申请人自己配置的神经元培养液可以增强下丘脑细胞的活性。通过此方法获得下丘脑神经元细胞可以进行基因功能验证和种质资源保存等相关实验,对重口裂腹鱼分子功能机制的研究具有重要意义。

主权项:1.一种重口裂腹鱼下丘脑细胞体外培养方法,其特征在于,包括下述步骤:1在清洗培养液中将下丘脑从脑组织中分离下来,剪成下丘脑组织块;将下丘脑组织块在胰酶的清洗培养液中水浴消解;2除掉清洗培养液吸去,加入含有DNaseI的清洗培养液,室温静置以消解细胞间的DNA连接;除去含有DNaseI的清洗培养液后加入EDTA无钙离子培养液并立即除去;3将步骤(2)中经处理后的下丘脑组织块转移到离心管中,向管中加入含DNaseI的培养液,吹打下丘脑组织块,此时将上层细胞使用细胞筛过滤后,离心,收集到细胞;4离心结束后,去除上层培养液,加入培养液重悬浮细胞进行培养,使得每孔中FBS的终含量不低于10%;5下丘脑细胞在不低于10%的FBS培养液中培养后,除去培养基,加入神经元培养液继续培养,完成重口裂腹鱼下丘脑细胞体外培养的过程。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国长江三峡集团有限公司中华鲟研究所 一种重口裂腹鱼下丘脑细胞体外培养方法

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