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申请/专利权人：大连博源医学科技有限公司
摘要：本发明公开了一种血浆中儿茶酚胺代谢物的液相色谱串联质谱检测方法和组合稳定剂及其应用。该检测方法首先通过向采血管中添加组合稳定剂，所述组合稳定剂由以下质量分数的组分组成：抗坏血酸0.5％～2％、5‑羟基阿魏酸0.15％～1％、甲酸0.5～2％以及纯水，所述纯水补足至100％；从而保证了分析前样本的稳定性，其次通过对样本进行衍生化并在衍生化过程中加入衍生稳定剂L‑抗坏血酸以提高衍生化效率，提高了检测灵敏度、特异性、检测通量及检测准确度，具有较高的应用价值。
主权项：1.一种血浆中儿茶酚胺代谢物的液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1采集患者全血样本3～4mL置于含有抗凝剂的采血管中；2向上述采血管中加入9～11μL组合稳定剂，再将采血管轻轻颠倒数次混匀；3将步骤2混匀后的采血管置于3000rpm，25℃，离心分离10min，取上清液置于1.5mLEP管中，得待测血浆样本；4取步骤3得到的待测血浆样本置于离心管中，加入10～20μL内标工作溶液混合，再加入300～900μL沉淀剂进行蛋白沉淀，经离心分离，得上清液；5将步骤4得到的上清液中依次加入5～10μL衍生稳定剂水溶液、50～200μL衍生剂的乙腈溶液和100～300μL缓冲液，混合后在温度为30～90℃进行衍生化反应，反应时间为5～30min，得到衍生化样本；6将步骤5得到的衍生化样本加入经甲醇活化、去离子水平衡的固相萃取小柱中进行过柱，经淋洗、洗脱，收集洗脱液，再经离心分离，得上清液；7将步骤6得到的上清液进行LC-MSMS检测；8将步骤7检测得到的待测血浆样本中儿茶酚胺代谢物峰面积与内标峰面积的比值代入到标准曲线方程中，计算得到待测血浆样本中儿茶酚胺代谢物的浓度；其中，所述组合稳定剂由以下质量分数的组分组成：抗坏血酸0.5％～2％、5-羟基阿魏酸0.15％～1％、甲酸0.5～2％以及纯水，所述纯水补足至100％；上述步骤5中所述的衍生稳定剂为L-抗坏血酸，L-抗坏血酸水溶液的浓度为0.05％～0.2％；所述儿茶酚胺代谢物为甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素和3-甲氧酪胺。
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百度查询： 大连博源医学科技有限公司 血浆中儿茶酚胺代谢物的液相色谱串联质谱检测方法和组合稳定剂
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