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申请/专利权人：吉林农业大学
申请日：2024-04-24
公开（公告）日：2024-06-07
公开（公告）号：CN118147015A
主分类号：C12N1/20
分类号：C12N1/20;C12N1/02;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/10
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.07#公开
摘要：本发明公开了一种土壤中芽孢杆菌分离纯化方法，属于微生物分离纯化领域，本发明针对芽孢菌的芽孢的特性耐高温而真菌及杂菌在56℃30min死亡的特性，取人参根际土壤，经过在液体培养基中的富集培养，芽孢菌和其余杂菌均生长，芽孢菌和其余菌竞争，生长出芽孢，芽孢经过高温存活，而其余菌死亡，存活的均为芽孢杆菌，再通过平板划线法于固体培养基上纯化，而成功分离出芽孢杆菌，大大提高了芽孢杆菌的分离效率。
主权项：1.一种土壤中芽孢杆菌分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、按照固液比1:10将人参根际土壤加入到生理盐水中，在摇床中摇匀30min，得到混悬液；S2、按照体积比1:10将混悬液加入到pH7.0±0.2的液体培养基中，37℃培养96h，得到培养液；S3、培养液用56℃水浴30min后，划线接种于pH7.0±0.2的固体培养基上，37℃培养48h；S5、待平板上长出单个菌落，挑取单个菌落接种于pH7.0±0.2的液体培养基中纯化增殖，37℃培养24h；S6、再用85℃水浴10min后，划线接种于pH7.0±0.2的固体培养基上，37℃培养48h；重复步骤S6两次；S7、待平板上长出单个菌落，挑取单个菌落接种于pH7.0±0.2的液体培养基中纯化增殖，37℃培养24h，即分离纯化得到芽孢杆菌；所述液体培养基包括如下重量份的原料：大豆蛋白胨10.0份；牛肉浸粉0.5份；酵母浸粉5.0份；葡萄糖10.0份；氯化钠0.5份；硫酸镁0.2份；硫酸锰0.04份；ddH2O1000份；所述固体培养基为所述液体培养基加入其总质量1.5％的琼脂，调pH6.8-7.0，115℃灭菌15min，倒平板所得。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 吉林农业大学 一种土壤中芽孢杆菌分离纯化方法
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