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申请/专利权人：江西烈冰生物科技有限公司

摘要：本发明涉及一种微点阵芯片及其制备方法和应用，所述的微点阵芯片包括基片和基片上表面连接的核酸分子标识符微点阵，所述的微点阵为四边形，所述的微点阵芯片实现了在极小的基片面积下能高密度修饰有核酸分子标识符微点阵，同时使用了极微量的核酸分子标识符，以极低的试剂成本实现芯片的制备，且操作简单，适用于大规模工业化制作，应用领域广泛，可以用于基因、蛋白等生物分子的检测，提高了检测的分辨率。

主权项：1.一种微点阵芯片的制备方法，其特征在于，所述微点阵芯片包括基片和所述基片上表面连接的核酸分子标识符微点阵，所述核酸分子标识符微点阵形状为四边形；所述核酸分子标识符微点阵通过微流控芯片技术连接基片上表面，具体步骤如下：将平行排布的微孔道贴附于基片上表面，通过微流控芯片技术在微孔道中分别通入各不相同的第一组核酸分子标识符，使其连接于基片上表面，并除去未连接的核酸分子标识符，第一组核酸分子标识符从5’至3’端的组成依次为通用区、空间坐标序列一和核酸分子标识符杂交区；然后将微孔道以不同于上述孔道方向的方向再次贴附于基片上表面，通过微流控芯片技术在微孔道中分别通入各不相同的第二组核酸分子标识符，第二组核酸分子标识符从5’至3’端的组成依次为核酸分子标识符捕获区、分子标签、空间坐标序列二和核酸分子标识符杂交区；通过核酸分子标识符杂交区使第二组核酸分子标识符与第一组核酸分子标识符Watson-Crick碱基互补配对原则产生互补杂交，在微孔道中通入延伸反应液孵育，对杂交后的核酸分子标识符进行扩增延伸反应，使基片上表面产生携带空间坐标的唯一核酸分子标识符，其从5’至3’端的组成为通用区、空间坐标序列一、核酸分子标识符杂交区、空间坐标序列二、分子标签和核酸分子标识符捕获区；所述核酸分子标识符捕获区为用于捕获核酸的核酸序列；分子标签用于为唯一核酸分子标识符所捕获的核酸提供标签，所述分子标签的核酸序列的顺序是唯一的；核酸分子标识符杂交区用于使第二组核酸分子标识符与第一组核酸分子标识符Watson-Crick碱基互补配对原则产生互补杂交；通用区从5’至3’端由活性反应位点和引物结合位点组成，引物结合位点为用于结合通用引物的核酸序列以进行核酸分子标识符的扩增，活性反应位点用于和基片表面的连接；空间坐标序列一或空间坐标序列二为用于对唯一核酸分子标识符进行定位的核酸序列；通入每一条所述平行排布微孔道的核酸分子标识符的空间坐标序列彼此不同且可以相互区分。

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