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申请/专利权人：南开大学
申请日：2024-04-16
公开（公告）日：2024-06-21
公开（公告）号：CN118222634A
主分类号：C12N15/867
分类号：C12N15/867;C12N15/65;C12N15/53;C12N5/10;C12N5/071
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.21#公开
摘要：本发明属于生物医学技术领域，主要涉及一种可示踪诱导性多能干细胞的构建方法及其应用。本发明采用慢病毒载体基因转染技术，利用增强型绿色荧光蛋白EGFP和萤火虫荧光素酶Fluc‑Luciferase报告基因组成的慢病毒载体感染诱导性多能干细胞IPSCs，建立荧光示踪的诱导性多能干细胞，可以在不改变干性表达的情况下，对IPSCs进行示踪，经多次传代后，仍具有良好的生物发光成像能力；同时，不影响其发育为胰腺祖细胞，并且分化后的胰腺祖细胞仍然具有良好的荧光成像及生物发光成像能力。所以，本发明的构建方法能够在干细胞分化为胰岛类器官过程中对诱导多能干细胞的分化过程实现有效的示踪。
主权项：1.一种可示踪诱导性多能干细胞的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：采用目的质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞，产生病毒液；所述目的质粒中含有表达标记物的基因和抗性基因；所述标记物为增强型绿色荧光蛋白，或者增强型绿色荧光蛋白和萤火虫荧光素酶；将所述病毒液与诱导性多能干细胞培养基按体积比1∶1混合得到含病毒液的培养基，再将含病毒液的培养基加入诱导性多能干细胞进行慢病毒感染；筛选得到表达所述标记物的诱导性多能干细胞。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南开大学 一种可示踪诱导性多能干细胞的构建方法及其应用
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