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申请/专利权人：维尔纽斯大学
申请日：2013-03-20
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN114410625B
主分类号：C12N15/113
分类号：C12N15/113;C12N9/22;C12N15/10;C12N15/90;C12Q1/6811
优先权：["20120320 US 61/613,373","20120417 US 61/625,420"]
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.25#授权;2022.05.20#实质审查的生效;2022.04.29#公开
摘要：嗜热链球菌CRISPR3Cas系统的Cas9‑crRNA复合物的分离或体外组装及其用于DNA裂解的用途，所述DNA具有与crRNA互补的核苷酸序列和原型间隔子毗邻基序。使用RNA导向的DNA核酸内切酶在体外或体内对靶标DNA分子进行位点特异性修饰的方法，所述DNA核酸内切酶包含RNA序列及RuvC活性位点基序和HNH活性位点基序中至少一种；通过至少一个点突变使多肽中活性位点RuvC或HNH之一失活将Cas9多肽转化为双链DNA的切口酶裂解一条链的方法；在体内或体外组装活性多肽‑多核糖核苷酸复合物的方法；以及在体外对Cas9‑crRNA复合物的特异性进行重新编程的方法，该方法中使用了含有单一的重复序列‑间隔子‑重复序列单元的序列盒子。
主权项：1.制备针对靶DNA分子具有工程改造的特异性的Cas9-crRNA复合物的方法，所述方法包括：将多核苷酸工程改造以编码能够与所述靶DNA分子的多核苷酸序列以位点特异性方式结合的成簇的规律间隔的短回文重复序列CRISPRRNAcrRNA，其中所述工程改造包括将所述多核苷酸的序列重新编程以编码与所述靶DNA分子的多核苷酸序列互补的crRNA的多核苷酸序列，所述多核苷酸还编码反式激活RNAtracrRNA；将编码所述crRNA和所述tracrRNA的多核苷酸与编码CRISPR相关多肽9Cas9多肽的多核苷酸在体外组合；及形成Cas9-crRNA复合物，其中所述Cas9-crRNA复合物针对所述靶DNA分子的位点具有工程改造的特异性，用于修饰所述靶DNA分子。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 维尔纽斯大学 通过Cas9-crRNA复合物的RNA指导的DNA裂解
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2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。
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