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一种恒温扩增方法及试剂盒 

申请/专利权人:深圳华大生命科学研究院

申请日:2022-12-28

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN118256601A

主分类号:C12Q1/6844

分类号:C12Q1/6844

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.28#公开

摘要:本发明公开了一种恒温扩增方法及试剂盒。本发明提供了一种恒温扩增方法,所述方法为:在给定gRNA的引导下,使用可在任意特定位点进行酶切的切口酶对DNA片段上的目标位置进行酶切形成一个切口;再通过链置换DNA聚合酶从所述切口处开始进行链置换反应,得到目标ssDNA;其中,所述酶切和所述链置换反应是在一个恒温反应体系中进行循环,实现恒温扩增。本发明具有以下优势:针对dsDNA靶基因的检测,第一步无需高温变性解链;2无需人为引入酶切位点;3整个反应过程完全在恒温条件下;4采用高特异性的SpRYn内切酶;不依赖于PAM序列。

主权项:1.一种恒温扩增方法,其特征在于,所述方法为:在给定gRNA的引导下,使用可在任意特定位点进行酶切的切口酶对DNA片段上的目标位置进行酶切形成一个切口;再通过链置换DNA聚合酶从所述切口处开始进行链置换反应,得到目标ssDNA;其中,所述酶切和所述链置换反应是在一个恒温反应体系中进行循环,实现恒温扩增。

全文数据:

权利要求:

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