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申请/专利权人：上海交通大学
申请日：2024-04-10
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN118256598A
主分类号：C12Q1/6816
分类号：C12Q1/6816
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.28#公开
摘要：本发明公开一种基于CRISPR‑Cas12的单链核酸选择性切割方法，包括以下步骤：S1，设计并制备可激活CRISPR‑Cas12反式切割活性的HelperDNA；S2，设计引物，通过PCR将想要保留的单链DNA扩增成双链DNA以保留靶向单链DNA；S3，制备crRNACas12预混液；S4，将该预混液与步骤S2中的溶液以及HelperDNA混合，利用CRISPR‑Cas12的反式切割活性实现选择性切割单链DNA。本发明方法操作简单，成本较低，分离周期短，可从低浓度的复杂单链DNA体系中精准捕获某一种或多种序列特异性ssDNA，且获得的ssDNA纯度较高，因此本发明具有良好的应用前景。
主权项：1.一种基于CRISPR-Cas12的单链核酸选择性切割方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，设计并制备可激活CRISPR-Cas12反式切割活性的HelperDNA；S2，设计引物，通过PCR将想要保留的单链DNA扩增成双链DNA，以保留混合体系中的靶向单链DNA；S3，制备crRNACas12预混液；S4，将步骤S3制备的crRNACas12预混液与步骤S2制备的溶液以及步骤S1制备的HelperDNA混合，利用CRISPR-Cas12的反式切割活性实现选择性切割单链DNA。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海交通大学 一种基于CRISPR-Cas12的单链核酸选择性切割分离方法
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