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申请/专利权人：江南大学
申请日：2021-12-08
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN114277044B
主分类号：C12N15/60
分类号：C12N15/60;C12N1/19;C12N15/81;C12P19/12;C12P19/04;C12P19/00;C12R1/84
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.28#授权;2022.04.22#实质审查的生效;2022.04.05#公开
摘要：本发明公开了一种分泌结冷胶裂解酶特异性降解结冷胶的基因工程菌及应用，属于基因工程技术领域。本发明实现了来源于芽孢杆菌的结冷胶裂解酶在毕赤酵母中的异源表达，重组结冷胶裂解酶活力合成的纯度得到提高。在温度35～55℃反应0.5h后酶活为62～410Umg，在pH6.0～8.0反应0.5h后酶活为125～392Umg，在含有金属离子的体系中反应0.5h后酶活为128～432Umg。本发明生产出的结冷胶裂解酶具有产量和纯度较高的优点，是更为经济、环保、可持续的生产结冷胶寡糖的方式，更有利于推动生物法合成结冷胶裂解酶降解结冷胶制备结冷胶寡糖的工业化进程。
主权项：1.一种摇瓶发酵制备结冷胶裂解酶的方法，其特征在于，所述方法为将基因工程菌的种子液以体积比20~60%的接种量接种于培养基中进行发酵，直至碳源耗尽，饥饿培养1.5~2.5h后，每隔20~30h补加甲醇，诱导60~80h；所述基因工程菌以质粒pPIC9K为表达载体；以毕赤酵母GS115为宿主，表达核苷酸序列如SEQIDNO.1所示编码结冷胶裂解酶的基因，所述培养基的pH为4.0~8.0，所述甲醇浓度为0.2~2%。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江南大学 一种分泌结冷胶裂解酶特异性降解结冷胶的基因工程菌及应用
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