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申请/专利权人：北京航空航天大学杭州创新研究院;杭州乐为生医科技有限公司
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于抗体寡核苷酸偶联的方法。所述方法包括使用异型双功能交联剂E‑6‑4‑2‑甲基磺酰基乙烯基苯氧基己酸‑N‑琥珀酰亚胺酯将抗体与巯基修饰的寡核苷酸偶联在一起。本发明已发现式I的化合物特别适合用作异型双功能交联剂将抗体和寡核苷酸偶联在一起，并且更重要的，可以进行单步法偶联，而不会出现不想要的聚合或自身偶联，这简化了操作，并且减少了对抗体的处理次数，从而避免抗体在处理过程中结构发生改变而导致活性降低的风险。
主权项：1.一种用于抗体寡核苷酸偶联的方法，其特征在于，包括使用异型双功能交联剂E-6-4-2-甲基磺酰基乙烯基苯氧基己酸-N-琥珀酰亚胺酯将抗体与巯基修饰的寡核苷酸偶联在一起；所述异型双功能交联剂通过巯基迈克尔加成反应与巯基修饰的寡核苷酸连接，并且通过琥珀酰亚胺酯与抗体上伯胺基的反应而与所述抗体连接；使用还原剂对巯基修饰的寡核苷酸进行活化，以将巯基修饰的寡核苷酸中的二硫键还原为活性巯基；所述方法包括：（1）将所述异型双功能交联剂与巯基修饰的寡核苷酸进行偶联反应，得到偶联中间体；（2）然后将所述偶联中间体与抗体进行偶联反应，得到抗体寡核苷酸偶联物；偶联反应均在pH为8.0的磷酸盐缓冲液中进行；所述抗体、巯基修饰的寡核苷酸和异型双功能交联剂的摩尔比为1:5:20。
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权利要求：
百度查询： 北京航空航天大学杭州创新研究院 杭州乐为生医科技有限公司 一种用于抗体寡核苷酸偶联的方法
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