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申请/专利权人：柔脉医疗(深圳)有限公司;柔脉医疗(瑞士)股份公司

摘要：本发明属于组织工程技术领域，具体公开了一种组织工程人工血管及其制备方法和应用。本发明的制备方法包括：在管状细胞支架的内层接种血管内皮细胞和平滑肌细胞，混合培养7～13天；更换促分泌培养基，同时在所述管状细胞支架内施加灌流搏动压力，继续培养8～13天后，在所述管状细胞支架的外层接种血管成纤维细胞培养，更换混合培养基进行共培养8～13天；将所述混合培养基替换为促分泌培养基，共培养10～16天后，原位脱细胞处理，即得组织工程人工血管。本发明能制备小口径人工血管，制备方法能促进细胞外基质的分泌，使制得的人工血管具有更好的机械强度和弹性，并缩短了培养时间，满足对人工血管和临床治疗的需求。

主权项：1.一种组织工程人工血管的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、在管状细胞支架的内层接种血管内皮细胞和平滑肌细胞，混合培养7~13天；S2、更换促分泌培养基，同时在所述管状细胞支架内施加灌流搏动压力，继续培养8~13天后，在所述管状细胞支架的外层接种血管成纤维细胞培养，更换混合培养基进行共培养8~13天；S3、将所述混合培养基替换为促分泌培养基，共培养10~16天后，原位脱细胞处理，即得组织工程人工血管；所述管状细胞支架由可降解高分子材料制成；所述管状细胞支架的壁厚为0.1~2.5mm；步骤S1所述混合培养的培养基为血管内皮细胞培养基和平滑肌细胞培养基按体积比为1：2~10混合后的培养基，步骤S2所述混合培养基为血管内皮细胞培养基、平滑肌细胞培养基和成纤维细胞培养基按体积比为1：4~10：2~5混合后的培养基；步骤S1所述混合培养的培养基中含有浓度为10%~25%的人血小板裂解液HPL；步骤S2所述混合培养基中含有浓度为5%~15%的人血小板裂解液HPL；步骤S2所述促分泌培养基包含：细胞因子、氨基酸和维生素，以及8%~12%的人血小板裂解液HPL，所述细胞因子包括VEGF、PDGF、IGF、HGF、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、BMP中的至少一种，所述细胞因子浓度独立为1~20ngmL；步骤S3所述促分泌培养基包含：细胞因子、氨基酸和维生素，以及3%~7%的人血小板裂解液HPL，所述细胞因子包括bFGF、IGF、HGF、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、BMP中的至少一种，所述细胞因子浓度独立为1~20ngmL；所述氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸和脯氨酸，所述氨基酸浓度独立为20-60mgmL；所述维生素包括维生素B和维生素C，所述维生素浓度独立为30-100mgmL。

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