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申请/专利权人：浙江省动物疫病预防控制中心(浙江省兽药饲料监察所)
摘要：本发明公开了一种用于鉴别非洲猪瘟病毒基因I型和II型的PCR‑RFLP方法，通过先进行PCR扩增，再对PCR扩增产物进行BmgBI酶切，酶切产物进行电泳，然后进行RFLP分析，若结果为2226bp或2227bp的1个片段，则确定为非洲猪瘟病毒基因I型；若结果为1715bp和510bp大小的2个片段，则确定为非洲猪瘟病毒基因II型。本发明不仅能快速的区分非洲猪瘟病毒基因I型和II型，且在短时间内实现对B646L基因全序列的检测检测靶标覆盖B646L基因全序列，具有简便、特异性强、灵敏度高、准确性高、稳定、经济的优点，为相关农业科研人员以及基层兽医技术人员开展非洲猪瘟病毒基因I型和II型的鉴定及非洲猪瘟疫情的监测预警提供新的技术支持。
主权项：1.一种用于鉴别非洲猪瘟病毒基因I型和II型的PCR-RFLP方法，所述PCR-RFLP方法为非疾病诊断为目的，其特征在于，包括以下步骤：1提取检测样品的病毒基因组DNA；2以步骤1中病毒基因组DNA为PCR扩增模板，以PCR-RFLP引物为PCR扩增引物，进行PCR扩增获得PCR扩增产物，所述PCR-RFLP引物包括：上游引物2225-F：5’-TGAAATAAAATGGAAGCCCACAGAT-3’，下游引物2225-R：5’-CTGCYAGCAAGAGCGTGTCAATAAT-3’，其中下游引物2225-R中Y＝CT；3将步骤2所得PCR扩增产物进行BmgBI酶切，酶切产物进行电泳，然后进行RFLP分析，若结果为2226bp或2227bp的1个片段，则确定为非洲猪瘟病毒基因I型；若结果为1715bp和510bp大小的2个片段，则确定为非洲猪瘟病毒基因II型。
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百度查询： 浙江省动物疫病预防控制中心(浙江省兽药饲料监察所) 一种用于鉴别非洲猪瘟病毒基因I型和II型的PCR-RFLP方法
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