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申请/专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日：2023-03-24
公开（公告）日：2023-07-04
公开（公告）号：CN116376959A
主分类号：C12N15/82
分类号：C12N15/82;C12N15/61;A01H5/10;A01H5/00;A01H6/82
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2023.07.21#实质审查的生效;2023.07.04#公开
摘要：本发明公开了一种利用引导编辑系统创制高含量冷杉醇烟草的方法，包括以下步骤：1载体构建：合成引导编辑系统的表达框并连接至pORE骨架载体中，形成pORE‑PE‑Nt4重组载体；2遗传转化：将构建好的载体转入农杆菌，筛选获得阳性单克隆，经液体培养基过夜培养后，吸取至固体平板中，28℃过夜培养形成菌苔备用，转化烟草品种，获得高含量冷杉醇烟草。本申请通过优化的PE技术将烟草NtCPS2基因292位的碱基T突变为碱基G，成功创制了烟草栽培品系；PE技术方案可在12个月左右获得纯合体；相比现有烤烟品种大白筋599，经引导编辑创制的红花大金元烤烟品种纯合体冷杉醇含量可提升32％；PE技术方案不导入其他与NtCPS2基因连锁的负面表型DNA片段，不会带来负面表型。
主权项：1.一种利用引导编辑系统创制高含量冷杉醇烟草的方法，其特征在于，包括以下步骤：1载体构建：合成引导编辑系统的表达框并连接至pORE骨架载体中，形成pORE-PE-Nt4重组载体；2遗传转化及素材创制：将构建好的载体转入农杆菌，筛选获得阳性单克隆，经液体培养基过夜培养后，吸取200μL至固体平板中，28℃过夜培养形成菌苔备用，转化烟草品种，获得冷杉醇合成关键基因NtCPS2第292位碱基T突变为G的烟草，即高含量冷杉醇烟草。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 云南中烟工业有限责任公司 一种利用引导编辑系统创制高含量冷杉醇烟草的方法
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