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一种与特定短肽标签融合能高效催化Reb M生成的重组酶 

申请/专利权人:天津大学;中化健康产业发展有限公司

申请日:2021-12-06

公开(公告)日:2023-10-20

公开(公告)号:CN114196696B

主分类号:C12N15/70

分类号:C12N15/70;C12N15/75;C12N15/81;C12N15/54;C12N1/21;C12N1/19;C12N9/10;C12P19/56;C12P19/18;C12R1/19;C12R1/125;C12R1/84;C12R1/865

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2023.10.20#授权;2022.04.05#实质审查的生效;2022.03.18#公开

摘要:本发明公开了一种与特定短肽标签融合的能高效催化RebM生成的重组酶,主要构建步骤为:将四个短肽标签的DNA片段分别构建至线性化质粒pET‑UGT2中,获得重组质粒,转入宿主细胞,获得重组菌。本发明将编码与特定短肽标签融合的UGT2的核酸序列用于制备能够催化莱鲍迪苷D生成莱鲍迪苷M的重组蛋白,相比于野生型的UGT2蛋白,制备出的四个重组蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达均明显提高。在55℃温浴15min后,Sr76AC2及Sr76AC3重组酶的可溶蛋白残余量分别为UGT2的4.60倍和4.33倍,展现出比UGT2更好的热稳定性。

主权项:1.一种重组载体,其特征在于:该重组载体包含糖基转移酶UGT2与特定短肽标签的融合基因,所述重组融合基因的核酸序列为:aSEQIDNO.6-SEQIDNO.8所示的任一核苷酸序列;或b与a的核苷酸序列不同,能够编码SEQIDNO.2-SEQIDNO.4所示任一氨基酸序列的核苷酸序列。

全文数据:

权利要求:

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