申请/专利权人：广西壮族自治区畜牧研究所

申请日：2021-04-23

公开（公告）日：2024-05-07

公开（公告）号：CN113180878B

主分类号：A61D19/04

分类号：A61D19/04

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.07#授权;2021.08.17#实质审查的生效;2021.07.30#公开

摘要：本发明公开一种提高母牛双胎率的方法，该提高母牛双胎率的方法的步骤包括：授精、采卵、胚胎选择、受体牛预处理、移植、生产等步骤，本发明中使用优良种牛作为供体牛，通过超数排卵处理的方法获取多枚胚胎，再利用其他母牛作为受体牛，生产良种牛的后代，可以数倍的提高优良种牛的后代，加快优良种牛的扩繁速度，同时通过采用双胚胎移植的方法提高母牛的双胎率，增加了母牛一年生产两头牛犊的概率，提高母牛的繁殖率，保证牛犊产出的健康程度。

主权项：1.一种提高母牛双胎率的方法，其特征在于，所述提高母牛双胎率的方法的步骤包括：步骤1：授精，所述授精的具体步骤包括：供体牛的选择：选择需要繁殖的牛品种的母牛作为供体牛，供体牛应当具有较高的生产性能，体格健壮，无遗传性疾病，繁殖机能正常，发情周期正常，膘情良好，供体牛若为青年供体母牛则年龄在18月龄，若为经产供体母牛则年龄为3～8岁；供体牛的饲养管理：供体牛在进行超数排卵处理前，要保证给供体牛足够的优质干草、青贮或多汁饲料、精料以及维生素和矿物质，并供给清洁的饮水和盐，做到合理饲养，精心管理；超数排卵处理：在所述供体牛预埋孕酮栓后的11天后取出预埋的孕酮栓，并以预设频率通过肌肉注射的方式分4天减量注射促卵泡激素，该预设频率为早晚各一次，时间间隔12h-14h，并在所述供体牛肌肉注射促卵泡激素的第3天以所述预设频率同时肌肉注射前列腺素，所述前列腺素的质量范围为2.0mg～2.4mg；发情观察和人工授精：从肌肉注射前列腺素的第2天傍晚开始观察供体牛的发情情况，至少早晚各观察一次，在观察到供体牛接受爬跨后4h～6h进行第一次人工授精，间隔12h后第二次人工授精，且用加倍量，每次人工授精时还得触摸供体牛的卵巢；步骤2：采卵，所述采卵具体包括以下步骤：采卵时间，以供体牛发情日为第0天，在第5天～6天检查卵巢确定黄体数，以便于安排受体牛头数，第7天非手术回收卵，所述非手术回收卵包括以下步骤：器械和冲卵液的准备：灭菌处理过的冲卵管用磷酸缓冲盐溶液冲洗2～3次，插入钢芯，检查气球；将磷酸缓冲盐溶液置于37℃水浴中预温待用，准备好麻醉剂、注射器、酒精棉和冲洗消毒剂；供体牛的保定完毕后，在第一、二尾椎骨间用酒精消毒，用3ml～5ml的2％普鲁卡因作硬膜外麻醉；供体牛消毒灭菌处理：将麻醉后的供体牛的牛尾竖直绑在保定架上，清除粪便，用清水冲洗会阴部及外阴，再用高锰酸钾液冲洗消毒，用灭菌卫生纸擦干，最后用酒精棉球消毒外阴部；灌流法提取受精卵：冲卵管的插入和冲卵部位：将准备好的冲卵管交给术者的右手，术者左手食指和拇指扒开阴门插入冲卵管，再将左手伸入直肠，仔细小心地诱导冲卵管经子宫颈进入一侧子宫角至大弯处，抽出少许钢芯，再将冲卵管向前推，使其尖端靠近子宫角深部；由助手持30ml注射器一次推入10ml空气，然后按术者要求，以1ml计数充气；根据子宫大小及冲卵管在子宫的位置确定充气量，供体牛若为青年供体母牛则充气14ml～16ml，若为经产供体母牛则充气18ml～25ml；冲卵管固定后抽出钢芯，开始灌流；用50ml注射器，每次注入30ml～50ml的PBS冲卵液，分次冲洗子宫角，回收后注入加盖集卵杯；另一侧子宫角的冲洗是由术者右手拉直冲卵管，助手小心插入钢芯；术者的左手在直肠内诱导钢芯插稳后，给气球放气；术者再将冲卵管插入另一侧子宫角，用同样的方法冲洗；术后处理两侧子宫角冲卵完成后，将冲卵管抽出来，用输精枪将土霉素溶液注入子宫，该土霉素溶液由3g土霉素粉溶于100ml灭菌双蒸水或生理盐水配比而成，最后肌肉注射PGF2α；步骤3：胚胎选择：静置培养的所述受精卵培养得到胚胎，按预设条件挑选两个所述胚胎，并将挑选的两个所述胚胎进行胚胎移植；步骤4：受体牛预处理；对所述受体牛进行胚胎移植前护理、预埋孕酮栓以及同期发情处理，以使所述受体牛和所述供体牛的发情日差小于或等于1天；步骤5：移植：将所述胚胎移植于所述受体牛的子宫内，观察妊娠反应；步骤6：生产：对妊娠的所述受体牛进行饲养管理直至生产；在胚胎选择步骤之后还包括胚胎封存步骤，所述胚胎封存步骤包括：使用吸管依次吸入保存液、气泡、含有所述胚胎的冷冻液、气泡、保存液，对吸管加热封口。

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