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申请/专利权人：中山大学附属第六医院
申请日：2024-01-11
公开（公告）日：2024-05-28
公开（公告）号：CN118077681A
主分类号：A01N1/02
分类号：A01N1/02;C12N5/071
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.14#实质审查的生效;2024.05.28#公开
摘要：本发明公开了一种小鼠睾丸冷冻方法，涉及冷冻处理领域。包括以下步骤：将小鼠睾丸组织放置在含有冷冻保护剂的冻存管中，4℃预冷却平衡，冷冻保护剂包括5％FBS、5％DMSO、10‑7molL褪黑素和余量的培养基；将步骤1预冷后的冻存管进行慢速程序化冷冻，程序结束后投入液氮储存。本申请为减少小鼠睾丸组织冷冻‑复苏过程中的细胞凋亡、氧化应激问题，通过添加褪黑素在冷冻保护剂中，褪黑素可以减少睾丸组慢速程序化冷冻‑复苏后精原干细胞的丢失、凋亡细胞数量，并结合慢速程序化冷冻方法，整体减少精原干细胞UCHL1和精母细胞scp3的的损失，减少睾丸细胞的凋亡数量。
主权项：1.一种小鼠睾丸冷冻方法，其特征在于，包括以下步骤：1将小鼠睾丸组织放置在含有冷冻保护剂的冻存管中，4℃预冷却平衡，冷冻保护剂包括5％FBS、5％DMSO、10-7molL褪黑素和余量的培养基；2将步骤1预冷后的冻存管进行慢速程序化冷冻，冻存管放入慢速程序化冷冻仪中，冷冻程序为：第一降温阶段4℃降温到0℃，速率为-1℃分钟，0℃保持5分钟；第二降温阶段0℃降温到-8℃，速率为-0.5℃分钟；-8℃保持15分钟；第三降温阶段-8℃降温到-40℃，速率为-0.5℃分钟，-40℃保持10分钟；第四降温阶段以-7℃分钟的速度至-80℃，程序结束后投入液氮储存。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中山大学附属第六医院 一种小鼠睾丸冷冻方法
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