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申请/专利权人：中国人民解放军海军军医大学
申请日：2024-02-07
公开（公告）日：2024-05-31
公开（公告）号：CN118109412A
主分类号：C12N5/0786
分类号：C12N5/0786;C12N5/09;C12N15/06;C12N5/22
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.18#实质审查的生效;2024.05.31#公开
摘要：本发明涉及生物技术领域，提供了THP‑1诱导分化为巨噬细胞的方法及其在构建巨噬‑肿瘤杂合细胞模型中的应用。诱导分化方法如下：1将处于对数生长期的THP‑1细胞离心，用含10％胎牛血清以及1％双抗的RPMI1640培养基重悬，并在培养基中加入诱导剂；2细胞经计数后，用含所述诱导剂的RPMI1640培养基调整THP‑1细胞密度为5×105个mL，并将细胞种入六孔板，培养一定时间后，显微镜下观察THP‑1细胞由悬浮细胞分化为贴壁细胞，说明巨噬细胞诱导成功；采用含吞噬活性促进剂的培养基换液处理获得目标巨噬细胞。巨噬‑肿瘤杂合细胞模型构建方法如下：将巨噬细胞和癌细胞均消化为单细胞后，以密度比为1:4的比例将巨噬细胞和癌细胞于低粘附U型底孔板中进行共培养2小时。本发明获取具有高吞噬活性的巨噬细胞前后需要3天的时间，操作简单、快速、背景噪声低，同时避免伦理学限制。同时本发明杂合细胞的融合率可达5％～10％，较其他方法提高5倍左右。
主权项：1.一种THP-1诱导分化为巨噬细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：1将处于对数生长期的THP-1细胞离心，用含10％胎牛血清以及1％双抗的RPMI1640培养基重悬，并在培养基中加入诱导剂；2细胞经计数后，用含所述诱导剂的RPMI1640培养基调整THP-1细胞密度为5×105个mL，并将细胞种入六孔板，培养一定时间后，显微镜下观察THP-1细胞由悬浮细胞分化为贴壁细胞，说明巨噬细胞诱导成功；3采用含吞噬活性促进剂的培养基换液处理获得目标巨噬细胞。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国人民解放军海军军医大学 THP-1诱导分化为巨噬细胞的方法及其在构建巨噬-肿瘤杂合细胞模型中的应用
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