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【发明公布】一种防治橡胶树根病抑菌化合物的制备方法_云南省热带作物科学研究所_202410066132.8 

申请/专利权人:云南省热带作物科学研究所

申请日:2024-01-17

公开(公告)日:2024-06-04

公开(公告)号:CN118127095A

主分类号:C12P17/18

分类号:C12P17/18;C07D491/08;A01N43/90;A01P3/00;C12R1/04

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.06.21#实质审查的生效;2024.06.04#公开

摘要:本发明涉及防治橡胶树根病抑菌化合物的制备方法,属于抑菌化合物的技术领域,以放线菌Streptomycessamsunensis17‑7菌株为原料,通过制备发酵液、制备发酵产物、收集组分、分离纯化得到防治橡胶树根病抑菌化合物,确定了17‑7菌株发酵产物中的主要抑菌活性成分,为更有效的利用抑菌活性物质防治橡胶树根病奠定基础。

主权项:1.一种防治橡胶树根病抑菌化合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.发酵液制备挑取放线菌Streptomycessamsunensis17-7菌株单个菌落接种于液体高氏一号培养基中,置于28℃恒温振荡培养箱140rmin培养5d,得到种子液;准备优化发酵培养基,以10%的接种量接入已培养好的种子液,置于28℃恒温振荡培养箱140rmin培养5d后,收集发酵液;S2.发酵产物制备将发酵液倒入分液漏斗中,并加入等体积乙酸乙酯摇匀,使发酵液与乙酸乙酯充分混合,静置片刻,待发酵液与乙酸乙酯层完全分开,打开分液漏斗活塞,依次放出发酵液层和乙酸乙酯层,重复3次,将乙酸乙酯层合并经旋转蒸发仪减压浓缩得粗提物浸膏,为发酵产物;S3.组分收集1将17-7菌株的发酵产物用甲醇和水混合液溶解后用200-300目硅胶拌匀备用;2棉花塞柱,用二氯甲烷浸润;3取样品量10~20倍的硅胶用二氯甲烷润湿至无气泡,倒至硅胶柱中并反复压实;4上样,用二氯甲烷和甲醇体系进行梯度洗脱,体积比分别为100:1,80:1,60:1,40:1,20:1,10:1,5:1,2:1,经TLC合并,得到组分I;S4.抑制橡胶树褐根病菌化合物的制备将得到的组分I用二氯甲烷和甲醇体系进行梯度洗脱,体积比分别为80:1,60:1,40:1,20:1,10:1,5:1,2:1进行柱层析,经TLC合并,得到组分I-1;组分I-1经硅胶柱层析,硅胶柱层析洗脱剂为体积比为50:1的二氯甲烷和甲醇体系,得到组分I-1-1;组分I-1-1经硅胶柱层析,硅胶柱层析洗脱剂为体积比为50:1的二氯甲烷和甲醇体系,得到组分I-1-1-1;再经300~400目硅胶柱层析,硅胶柱层析洗脱剂为体积比为5:1的石油醚和乙酸乙酯体系,得到组分I-1-1-1-1;组分I-1-1-1-1使用SephadexLH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱层析反复纯化,再经硅胶柱层析,硅胶柱层析洗脱剂为体积比为20:1的二氯甲烷和甲醇体系,反复洗脱,经半制备液相色谱仪对其进一步纯化,以流动相为体积比35:75的乙腈水,流速为3mLmin,收集保留时间为6.0min的组分,得到抑制橡胶树褐根病菌化合物。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 云南省热带作物科学研究所 一种防治橡胶树根病抑菌化合物的制备方法

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