申请/专利权人:中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日:2024-05-13
公开(公告)日:2024-06-07
公开(公告)号:CN118147036A
主分类号:C12N1/21
分类号:C12N1/21;C12N9/44;C12N15/31;C12N15/75;C12R1/125
优先权:["20240318 CN 2024103079470"]
专利状态码:在审-公开
法律状态:2024.06.07#公开
摘要:本发明属于基因工程和生物技术领域,具体涉及一种可稳定表达目标产物的枯草芽孢杆菌及其应用。在出发菌株基因组上进行下述插入:在枯草芽孢杆菌的基因组的amyE位点、ytrF位点和ytxE位点;或者在amyE位点、ytrF位点、ytxE位点和trpp位点;或者在amyE位点、ytrF位点、ytxE位点和nprB位点均插入有普鲁兰酶基因表达框。实验表明,构建的枯草芽孢杆菌工程菌株在发酵78h胞外普鲁兰酶表达量高达3.2gL,酶活可达2465Uml,该方法构建的工程菌株传代稳定且表达量可达传统高拷贝质粒的效果。
主权项:1.一种可稳定表达目标产物的枯草芽孢杆菌,其特征在于,在枯草芽孢杆菌的基因组中整合有表达目标蛋白的基因元件,所述的基因元件依次是:启动子、目的基因、终止子元件,所述启动子为芽孢杆菌的启动子;所述整合是指将表达目标蛋白的基因元件在枯草芽孢杆菌基因组上进行下述任意之一的插入:在枯草芽孢杆菌的基因组的amyE位点、ytrF位点和ytxE位点均插入有普鲁兰酶基因表达框;在枯草芽孢杆菌的基因组的amyE位点、ytrF位点、ytxE位点和trpp位点均插入有普鲁兰酶基因表达框;或在枯草芽孢杆菌的基因组的amyE位点、ytrF位点、ytxE位点和nprB位点均插入有普鲁兰酶基因表达框。
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权利要求:
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