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申请/专利权人：武汉大学
申请日：2024-02-19
公开（公告）日：2024-06-18
公开（公告）号：CN118207194A
主分类号：C12N9/78
分类号：C12N9/78;C12Q1/6869
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.18#公开
摘要：本发明公开了一种人工改造胞嘧啶脱氨酶及DNA中5‑甲基胞嘧啶单碱基分辨率测序方法，涉及生物技术领域。本发明利用双加氧酶nTET蛋白，特异性地将5‑甲基胞嘧啶氧化为5moC包括5hmC、5fC、5caC，使得在人工改造胞嘧啶脱氨酶A3Am蛋白处理后，不同序列特征的5moC能够拮抗脱氨基，在随后的聚合酶链式反应扩增中扩增为胞嘧啶，而不同序列特征的胞嘧啶能够被A3Am完全脱氨基，在随后的聚合酶链式反应中扩增为胸腺嘧啶。因此，在最终的测序中只有5‑甲基胞嘧啶被读作胞嘧啶。该方法灵敏度高、选择性高、操作简便，不涉及亚硫酸氢盐处理，可直接获得DNA中5‑甲基胞嘧啶的单碱基分辨率定位。
主权项：1.一种人工改造的胞嘧啶脱氨酶，其特征在于：其氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 武汉大学 人工改造胞嘧啶脱氨酶及DNA中5-甲基胞嘧啶单碱基分辨率测序方法
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