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申请/专利权人：北京鑫康辰医学科技发展有限公司
申请日：2024-05-31
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN118255874A
主分类号：C07K14/78
分类号：C07K14/78;C07K1/34;C07K1/14;C12P21/02;C12N5/077;C12N13/00
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.28#公开
摘要：本发明涉及胶原蛋白制备技术领域，尤其是涉及一种天然活性胶原蛋白及其制备方法，通过原代提取或体外诱导，得到成纤维细胞；向成纤维细胞的重悬液中加入多孔微球，并依次经滚动孵育和悬浮培养；向培养体系中加入活化培养基，并进行孵育；向培养体系中加入刺激培养基，并在每次补加刺激培养基时通入射频电流；将细胞培养上清液调至酸性；向细胞培养上清液中加入复合消化酶进行消化反应；细胞培养上清液依次经透析和超滤处理，得到胶原蛋白溶液；经冷冻干燥处理，得到胶原蛋白。本发明可获得每毫升毫克级别的具有天然活性的胶原蛋白，解决了常规体外培养成纤维细胞并从细胞培养上清液中提取胶原蛋白含量较低的问题。
主权项：1.一种天然活性胶原蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、细胞获取：通过原代提取或体外诱导，得到成纤维细胞；S2、细胞接种：向成纤维细胞的重悬液中加入多孔微球，并依次经滚动孵育和悬浮培养；S3、细胞活化：向培养体系中加入活化培养基，并进行孵育；S4、序贯刺激：向培养体系中加入刺激培养基，并在每次补加刺激培养基时通入射频电流；S5、酸碱度调节：将细胞培养上清液调至酸性；S6、免疫原去除：向细胞培养上清液中加入复合消化酶进行消化反应；S7、提取纯化：细胞培养上清液依次经透析和超滤处理，得到胶原蛋白溶液；S8、冻干：经冷冻干燥处理，得到胶原蛋白。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京鑫康辰医学科技发展有限公司 一种天然活性胶原蛋白及其制备方法
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