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申请/专利权人：天津大学
摘要：本发明公开了一种蓝细菌多基因RBS文库构建方法，包括：步骤S1，构建基础质粒；步骤S2，构建编辑质粒；步骤S3，构建编辑靶标质粒；步骤S4，将编辑质粒和编辑靶标质粒共同转入大肠杆菌中，在LB培养基中加入1μgmL的脱水四环素黑暗条件下诱导48小时，完成初级RBS文库的构建；步骤S5，将构建好的初级RBS文库转入至蓝细菌中，完成RBS文库的构建，并对RBS文库进行验证。本发明促进了蓝细菌代谢工程的发展，并为蓝细菌中特殊基因的转入及相关研究提供解决方案。
主权项：1.一种蓝细菌多基因RBS文库构建方法，其特征在于，包括：步骤S1，构建基础质粒pANS-Kan-BsaICcdB-Pj23101-TetR-R40L22-TadA-linker-nCas9；步骤S2，构建编辑质粒pANS-Kan-1gRNA8A-2gRNA8A-Pj23101-TetR-R40L22-TadA-linker-nCas9和pANS-Kan-gRNALux-Pj23101-TetR-R40L22-TadA-linker-nCas9；步骤S3，构建编辑靶标质粒pANS-P15A-Spe-Pj23119-8A-YFP、pANS-P15A-Spe-Pj23119-8A-EctA-8A-EctB-8A-EctC和pANL-Cm-Pj23119-LuxABCDEM；步骤S4，将编辑质粒和编辑靶标质粒共同转入大肠杆菌中，在LB培养基中加入1μgmL的脱水四环素黑暗条件下诱导48小时，完成初级RBS文库的构建；步骤S5，将构建好的初级RBS文库转入至蓝细菌中，完成RBS文库的构建，并对RBS文库进行验证。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 天津大学 一种蓝细菌多基因RBS文库构建方法
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